重组大肠杆菌表达外源蛋白的共性发酵调控策略研究



重组大肠杆菌表达外源蛋白的共性发酵调控策略研究

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重组大肠杆菌表达外源蛋白的共性发酵调控策略研究

论文目录
摘要	第1-6页
Abstract	第6-10页
第1章前言	第10-25页
· 重组蛋白药物的市场概况	第10-12页
· 重组大肠杆菌表达系统	第12-17页
· 表达载体与宿主菌	第13-14页
· 重组蛋白在大肠杆菌中的表达形式	第14-17页
· 重组大肠杆菌高密度发酵	第17-19页
· 重组蛋白的分离纯化方法	第19-20页
· 大肠杆菌重组蛋白的可溶性表达	第20-23页
· 发酵策略的控制	第21-22页
· 共表达分子伴侣	第22-23页
· 融合表达技术	第23页
· 本课题的目的、意义和主要研究内容	第23-25页
第2章大肠杆菌重组蛋白发酵调控策略研究	第25-46页
· 引言	第25页
· 实验材料	第25-29页
· 菌种与质粒	第25-26页
· 仪器与试剂	第26-27页
· 培养基	第27页
· SDS-PAGE凝胶电泳	第27-29页
· 实验方法	第29-33页
· 表达rhGH大肠杆菌的培养	第29页
· 表达rhGH大肠杆菌的发酵调控策略	第29-30页
· 多种重组大肠杆菌的发酵	第30页
· 参数测定方法	第30-33页
· 实验结果与分析	第33-44页
· 培养基中磷酸盐浓度对菌体生长和rhGH表达量的影响	第33-34页
· 提高rhGH表达量的补料策略对比	第34-41页
· 三种补料策略的补料分批发酵结果分析	第41-42页
· 多种重组蛋白的发酵表达	第42-44页
· 小结	第44-46页
第3章大肠杆菌重组蛋白的可溶性表达研究	第46-60页
· 引言	第46页
· 实验材料	第46-48页
· 菌种与质粒	第46页
· 仪器和试剂	第46-48页
· 培养基	第48页
· 蛋白纯化相关溶液	第48页
· 实验方法	第48-50页
· 最佳诱导表达时间的选择	第48页
· 重组LT-A的可溶性表达	第48-50页
· 重组大肠杆菌不耐热肠毒素包涵体的纯化	第50页
· 实验结果与分析	第50-59页
· 诱导表达时间对重组LT-A表达量的影响	第50-51页
· 诱导剂添加时刻对重组LT-A可溶性表达的影响	第51-52页
· IPTG浓度对重组LT-A可溶性表达的影响	第52页
· 培养基中葡萄糖浓度对重组LT-A可溶性表达的影响	第52-53页
· 卡那霉素添加量对重组LT-A可溶性表达的影响	第53-54页
· 蔗糖添加量对重组LT-A可溶性表达的影响	第54页
· 重组大肠杆菌分批发酵表达可溶性LT-A	第54-55页
· 重组大肠杆菌补料-分批发酵表达可溶性LT-A	第55-57页
· 包涵体LT-A的变性和复性	第57页
· 包涵体LT-A的层析纯化	第57-59页
· 小结	第59-60页
第4章重组大肠杆菌表达外源蛋白的共性发酵技术总结与展望	第60-62页
· 论文总结	第60-61页
· 展望	第61-62页
致谢	第62-63页
参考文献	第63-67页

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