论文目录 | |
| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-25页 |
| · 农作物秸秆的利用现状 | 第9-10页 |
| · 我国农作物秸秆资源现状 | 第9页 |
| · 秸秆的主要成分 | 第9页 |
| · 秸秆利用方式及存在的问题 | 第9-10页 |
| · 栽培食用菌是一种经济高效的利用农作物秸秆的方式 | 第10-13页 |
| · 食用菌的生产意义 | 第10-11页 |
| · 秸秆栽培食用菌对生态农业的意义 | 第11页 |
| · 河南省利用秸秆生产食用菌的优势 | 第11-13页 |
| · 平菇概述 | 第13-14页 |
| · 平菇的分类及栽培 | 第13页 |
| · 平菇的食药用价值 | 第13-14页 |
| · 平菇的经济价值及选育的重要性 | 第14页 |
| · 平菇在秸秆降解中的应用 | 第14-16页 |
| · 平菇对秸秆木质素的选择性降解 | 第14-15页 |
| · 平菇降解酶系统 | 第15-16页 |
| · 食用菌遗传转化研究进展 | 第16-20页 |
| · 遗传转化方法 | 第16-19页 |
| · 食用菌启动子 | 第19-20页 |
| · 筛选标记 | 第20页 |
| · 平菇遗传转化研究进展 | 第20-22页 |
| · 构建平菇漆酶工程菌株的意义 | 第22-23页 |
| · 研究内容和技术路线 | 第23-25页 |
| 2 平菇SDI 启动子的克隆和潮霉素抗性载体的构建 | 第25-43页 |
| · 实验材料 | 第25-27页 |
| · 实验方法 | 第27-32页 |
| · sdi 启动子的克隆 | 第27-28页 |
| · hph 和CaMV 终止子大片段的扩增 | 第28-29页 |
| · sdi 启动子片段与hph 大片段重叠PCR | 第29-30页 |
| · 重叠PCR 产物与T 载体连接及转化 | 第30-31页 |
| · 测序检测 | 第31-32页 |
| · 结果与分析 | 第32-42页 |
| · sdi 启动子片段的扩增及测序分析 | 第32-36页 |
| · hph 和CaMV 终止子大片段扩增及测序 | 第36-38页 |
| · sdi 片段与 hph 大片段重叠 PCR | 第38-39页 |
| · hph 抗性载体转化子筛选及验证 | 第39-42页 |
| · 本章小结 | 第42-43页 |
| 3 平菇遗传转化体系的建立 | 第43-65页 |
| · 实验材料 | 第43-44页 |
| · 实验方法 | 第44-50页 |
| · 原生质体的制备与再生 | 第44-45页 |
| · 平菇菌株对潮霉素抗性的敏感性测验 | 第45页 |
| · 质粒25 号, pAN7-1 和PBHt1 的提取及纯化 | 第45页 |
| · PEG-CaCl_2介导的25 号质粒原生质体转化 | 第45-46页 |
| · 潮霉素抗性转化子的筛选和鉴定 | 第46-47页 |
| · 抗性转化子的遗传稳定性分析 | 第47-49页 |
| · PEG-CaCl_2介导质粒pAN7-1 和PBHt1 原生质体转化 | 第49-50页 |
| · 结果与分析 | 第50-63页 |
| · 原生质体的制备 | 第50-51页 |
| · 原生质体的再生 | 第51-52页 |
| · 平菇对潮霉素最低敏感浓度测定 | 第52-53页 |
| · 平菇含潮霉素抗性转化子的筛选 | 第53-55页 |
| · PCR 鉴定含潮霉素抗性的阳性转化子 | 第55-58页 |
| · 抗性转化子的遗传稳定性分析 | 第58-61页 |
| · pAN7-1 和 PBHt1 抗性质粒的转化 | 第61-63页 |
| · 本章小结 | 第63-65页 |
| 4 平菇漆酶基因POXC 的克隆和转漆酶工程菌株的构建 | 第65-85页 |
| · 实验材料 | 第65页 |
| · 实验方法 | 第65-72页 |
| · 平菇天达300 基因组总DNA 和总RNA 的提取 | 第65页 |
| · 平菇漆酶基因poxc 的克隆测序 | 第65-69页 |
| · 平菇漆酶poxc基因表达载体PIPOXC(或PI2POXC)的构建 | 第69-71页 |
| · 构建转漆酶工程菌株 | 第71-72页 |
| · 结果与分析 | 第72-83页 |
| · 平菇漆酶基因poxc 的克隆与分析 | 第72-78页 |
| · 表达载体PIPOXC(或PI2POXC)的构建及验证 | 第78-81页 |
| · 转漆酶高产菌株的构建和筛选 | 第81-83页 |
| · 本章小结 | 第83-85页 |
| 5 结论与讨论 | 第85-90页 |
| · 结论 | 第85-86页 |
| · 平菇sdi 启动子的克隆及潮霉素抗性载体的构建 | 第85页 |
| · 平菇遗传转化体系的建立 | 第85页 |
| · 平菇漆酶基因的克隆 | 第85-86页 |
| · 转漆酶工程菌株的构建 | 第86页 |
| · 讨论 | 第86-90页 |
| · 转化方法的选择 | 第86-87页 |
| · 以潮霉素抗性为筛选标记对转化率的影响 | 第87-88页 |
| · 不同启动子在平菇中驱动外源基因表达问题 | 第88-89页 |
| · 转基因菌株中外源基因的整合特性 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
| 英文摘要 | 第96-97页 |
