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烟草打顶前后根尖组织SSH-cDNA文库的构建与分析
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烟草打顶前后根尖组织SSH-cDNA文库的构建与分析
论文目录
 
致谢第1-7 页
摘要第7-8 页
· 文献综述第8-12 页
　　· 研究烟碱的意义第8 页
　　· 烟碱的生物合成第8-9 页
　　· 影响烟碱合成的因素第9-10 页
　　　　· 氮素对烟碱合成的影响第9 页
　　　　· 打顶对烟碱合成的影响第9-10 页
　　· 基因差异表达的研究方法——抑制性消减杂交(SSH)技术第10-12 页
· 引言第12-14 页
　　· 研究的依据和目的第12-13 页
　　· 研究的内容和技术路线第13-14 页
· 材料与方法第14-26 页
　　· 材料、试剂与仪器第14 页
　　　　· 材料第14 页
　　　　· 主要试剂第14 页
　　　　· 主要仪器第14 页
　　· 实验方法第14-26 页
　　　　· 总RNA的提取第14-15 页
　　　　· mRNA的分离第15 页
　　　　· 消减文库的构建第15-23 页
　　　　　　· cDNA第一条链的制备第15-16 页
　　　　　　· cDNA第二链的合成第16-17 页
　　　　　　· cDNA检测第17 页
　　　　　　· Rsa Ⅰ酶切第17-18 页
　　　　　　· 接头连接第18-19 页
　　　　　　· 连接效率检测第19-20 页
　　　　　　· 第一次杂交第20 页
　　　　　　· 第二次杂交第20-21 页
　　　　　　· 选择性PCR扩增第21-22 页
　　　　　　· SSH第二次PCR产物的纯化第22-23 页
　　　　· 消减cDNA文库的筛选(T/A克隆法)第23-24 页
　　　　　　· 连接第23 页
　　　　　　· 转化第23 页
　　　　　　· 阳性克隆的挑选与扩增第23-24 页
　　　　· 反向Northern杂交筛选第24-26 页
　　　　　　· 杂交点阵膜的制备第24 页
　　　　　　· 探针标记第24-25 页
　　　　　　· 检测探针效率第25 页
　　　　　　· 预杂交和杂交第25-26 页
　　　　　　· 差异筛选第26 页
· 结果与分析第26-37 页
　　· 总RNA质量的检测第26 页
　　· cDNA检测以及RSA Ⅰ酶切第26-27 页
　　· 连接效率检测第27-28 页
　　· SSH-cDNA文库的构建第28 页
　　· SSH-cDNA文库的筛选第28-31 页
　　　　· 菌落PCR验证第28-29 页
　　　　· 差异表达基因片段的反向Northern验证第29-31 页
　　　　　　· 反向Northern杂交探针效率检测第29-30 页
　　　　　　· 反向Northern验证第30-31 页
　　· ESTs生物信息学分析第31-36 页
　　　　· 序列比对和预测结果第31-33 页
　　　　· ESTs序列功能注释(Functional Annotation)第33-36 页
　　· 3个EST的RT-PCR分析第36-37 页
· 结论与讨论第37-39 页
参考文献第39-45 页
ABSTRACT第45-46页

本篇论文共46页，点击这进入下载页面。
 
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