基于分子改造和发酵优化提高透明质酸酶的表达 |
论文目录 | | | 摘要 | 第1-5页 | | Abstract | 第5-9页 | | 第一章 绪论 | 第9-15页 | | · 透明质酸酶概述 | 第9-10页 | | · 透明质酸酶简介 | 第9-10页 | | · 透明质酸酶的生物学功能 | 第10页 | | · 水蛭透明质酸酶的研究概况 | 第10页 | | · 毕赤酵母表达体系 | 第10-13页 | | · 毕赤酵母表达体系简介 | 第10-11页 | | · 毕赤酵母表达体系的特征 | 第11-12页 | | · 影响透明质酸酶在毕赤酵母中表达的关键因素 | 第12-13页 | | · 立题意义 | 第13-14页 | | · 本论文主要研究内容 | 第14-15页 | | 第二章 材料与方法 | 第15-24页 | | · 实验材料 | 第15-18页 | | · 菌株和质粒 | 第15-16页 | | · 主要试剂 | 第16-17页 | | · 培养基 | 第17页 | | · 主要仪器 | 第17-18页 | | · 实验方法 | 第18-24页 | | · DNA基本操作 | 第18-19页 | | · 信号肽基因克隆 | 第19-20页 | | · HAase基因LHyal的N端融合双亲短肽 | 第20-21页 | | · 培养方法 | 第21页 | | · 相关参数测定方法 | 第21-24页 | | 第三章 结果与讨论 | 第24-40页 | | · 最适信合肽的选择 | 第24-29页 | | · 信号肽HKR1，YTP1，SCS3，nsB基因的克隆 | 第24-25页 | | · 含不同信号肽表达质粒的构建 | 第25-26页 | | · 含不同信号肽重组质粒的整合表达及酶活分析 | 第26-27页 | | · 重组菌株GS115-nsB-LHyal的补料分批发酵培养 | 第27-28页 | | · 重组菌株GS115-nsB-LHyal的SDS-PAGE电泳分析 | 第28-29页 | | · N端融合双亲短肽提高透明质酸酶的分泌表达 | 第29-33页 | | · LHyal的N端融合双亲短肽 | 第29页 | | · 含不同双亲短肽重组质粒的构建 | 第29-30页 | | · 含不同双亲短肽重组质粒的整合表达及酶活分析 | 第30-31页 | | · 重组菌株GS115-nsB-AP2-LHyal的SDS-PAGE分析 | 第31-32页 | | · 融合蛋白AP2-HAase的酶学性质分析 | 第32-33页 | | · 融合短肽AP2 对透明质酸酶酶动力学参数的影响 | 第33页 | | · 阶段控温策略提高透明质酸酶的产量 | 第33-40页 | | · 诱导温度对菌体生长和透明质酸酶表达的影响 | 第34-37页 | | · 诱导温度对细胞活力的影响 | 第37-38页 | | · 诱导温度对醇氧化酶AOX酶活力影响 | 第38-39页 | | · 阶段控温策略表达透明质酸酶 | 第39-40页 | | 主要结论与展望 | 第40-42页 | | 主要结论 | 第40-41页 | | 展望 | 第41-42页 | | 致谢 | 第42-43页 | | 参考文献 | 第43-48页 | | 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |
|
|
|
| |
