猪流感（H1N1亚型）神经氨酸酶点突变拯救毒株的研究



猪流感（H1N1亚型）神经氨酸酶点突变拯救毒株的研究

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猪流感（H1N1亚型）神经氨酸酶点突变拯救毒株的研究

论文目录
摘要	第1-10页
Abstract	第10-12页
缩略语表	第12-14页
1 文献综述	第14-28页
· 猪流感病毒(Swine influenza virus)广泛传播与流行	第14-18页
· 世界范围内猪流感病毒的主要流行状况	第14-17页
· 古典型H1N1亚型猪流感病毒	第14-15页
· 类禽H1N1亚型猪流感病毒	第15-16页
· 类人H1N1亚型猪流感病毒	第16-17页
· 猪流感病毒宿主特异性和种间传播	第17-18页
· 猪流感病毒的宿主特异性及其变异性	第17-18页
· 猪流感病毒的宿主特异性	第17页
· 猪流感病毒的遗传变异性	第17-18页
· 猪流感病毒株的种间传播	第18页
· 流感病毒的简介	第18-20页
· 流感病毒的形态结构	第18-19页
· 流感病毒基因组的编码产物及其各部分功能	第19-20页
· 流感病毒理化性质特征	第20页
· pH稳定性	第20页
· 热稳定性	第20页
· 对化学试剂的稳定性	第20页
· 流感病毒神经氨酸酶的简介	第20-24页
· 猪流感病毒神经氨酸酶的基因结构	第20-22页
· 神经氨酸酶不同区域的功能	第22-24页
· 反向遗传操作技术的研究	第24-28页
2. 研究目的与意义	第28-29页
3. 材料与方法	第29-45页
· 材料	第29-31页
· 毒株与菌株	第29页
· 选用的细胞和鸡胚	第29-30页
· 主要试剂及酶	第30-31页
· 主要设备	第31页
· 质粒抽提相关溶液	第31页
· 方法	第31-45页
· 流感病毒感染细胞实验	第31-32页
· 引物设计与合成	第32-34页
· 病毒RNA的提取	第34页
· 病毒cDNA的合成	第34页
· 病毒cDNA的PCR扩增	第34-35页
· 八个转录/表达质粒的构建	第35-36页
· 转录/表达载体pHW2000的结构及工作原理	第35页
· 克隆流感病毒各片段cDNA到pHW2000的策略	第35页
· 八个转录/表达质粒的构建	第35-36页
· 转染质粒和转染细胞的准备	第36-37页
· 八质粒共转染	第37-38页
· 获救病毒的增殖	第38页
· 拯救病毒的鉴定	第38-41页
· 病毒血凝及血凝抑制鉴定	第38页
· RT-PCR扩增测序鉴定	第38-41页
· 获救病毒的电子显微镜观察	第41页
· TJ猪流感病毒点突变毒株的拯救	第41-42页
· 拯救毒株TJNA658和TJNA1254的鸡胚半数感染量	第42页
· 拯救毒株TJNA658和TJNA1254的毒力	第42页
· 拯救毒株在鸡胚中病毒增殖情况	第42页
· 拯救毒株对小鼠的毒力	第42页
· ELISA方法检测细胞因子变化	第42-43页
· 神经氨酸酶活性检测的方法	第43-44页
· 神经氨酸酶的二级结构空间预测	第44-45页
4. 结果与分析	第45-54页
· TJ毒株在细胞上适应结果	第45页
· 猪流感TJ细胞适应株和野毒株的序列比对结果	第45-46页
· 双向表达载体构建的结果	第46-47页
· 拯救毒株R-TJ鉴定结果	第47-48页
· 感染性克隆的构建结果	第48-49页
· 点突变拯救毒株的病毒增殖曲线的绘制	第49页
· 点突变拯救毒株小鼠动物模型试验结果	第49-50页
· 点突变拯救毒株的相关细胞因子检测	第50-51页
· 间接免疫荧光方法来验证蛋白的表达	第51-52页
· 神经氨酸酶活性的检测结果	第52-53页
· 点突变神经氨酸酶的二级结构预测结果	第53-54页
5. 讨论	第54-57页
6. 结论	第57-58页
参考文献	第58-68页
致谢	第68 页

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