大丽轮枝菌Vd991 T-DNA插入突变体库的构建及致病相关基因的筛选
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大丽轮枝菌Vd991 T-DNA插入突变体库的构建及致病相关基因的筛选
论文目录
摘要
第1-7页
Abstract
第7-11页
英文缩略表
第11-12页
第一章 绪论
第12-19页
· 黄萎病
第12-13页
· 黄萎病菌
第12-13页
· 黄萎病发病特征
第13页
· 大丽轮枝菌致病机理研究进展
第13-15页
· 大丽轮枝菌致病机理假说
第13-14页
· 大丽轮枝菌致病分子机理
第14-15页
· 农杆菌介导的真菌遗传转化
第15-18页
· 传统真菌遗传转化技术
第15-16页
· 农杆菌介导的真菌遗传转化机理
第16-18页
· 利用插入突变标记、克隆相关基因
第18页
· 本研究的实验目的和意义
第18-19页
第二章 大丽轮枝菌遗传转化双元载体的构建
第19-27页
· 实验材料
第19-20页
· 菌株和质粒
第19-20页
· 实验仪器
第20页
· 实验试剂
第20页
· 实验所用抗生素及其浓度
第20页
· 实验方法
第20-24页
· 质粒提取(碱裂解法)
第20-21页
· 琼脂糖凝胶电泳
第21页
· 琼脂糖凝胶回收
第21-22页
· 酶切反应
第22页
· 目的片段PCR 扩增
第22-23页
· PCR 产物纯化
第23页
· DNA 片段连接
第23页
· 大肠杆菌转化(热激转化法)
第23-24页
· 用于CaCl_2 转化法的农杆菌感受态细胞的制备
第24页
· 农杆菌转化(热激转化法)
第24页
· 实验结果
第24-26页
· 讨论
第26-27页
第三章 大丽轮枝菌T-DNA 突变体库的构建
第27-35页
· 实验材料
第27页
· 实验菌株
第27页
· 实验试剂
第27页
· 实验仪器
第27页
· 实验方法
第27-29页
· 大丽轮枝菌对潮霉素的抗性检测
第27页
· 大丽轮枝菌的遗传转化
第27-28页
· 用于PCR 检测的真菌DNA 快速提取方法
第28-29页
· 大丽轮枝菌突变体PCR 分子验证
第29页
· 突变体潮霉素抗性表达的稳定性实验
第29页
· 实验结果
第29-33页
· 大丽轮枝菌对潮霉素的抗性检测
第29-30页
· 转化条件的优化
第30-32页
· 大丽轮枝菌的遗传转化
第32页
· 突变体PCR 分子验证结果
第32-33页
· 突变体潮霉素抗性表达的稳定性实验
第33页
· 讨论
第33-35页
第四章 部分突变体表型鉴定与分析
第35-54页
· 实验材料
第35页
· 实验菌株
第35页
· 实验试剂
第35页
· 实验仪器
第35页
· 培养基及培养条件
第35页
· 实验方法
第35-38页
· 突变体产孢量的检测
第35页
· 突变体在培养基上生长直径的检测
第35-36页
· 大丽轮枝菌随机插入突变体致病性鉴定
第36-38页
· 实验结果
第38-53页
· 突变体在不同培养基中菌落形态的检测结果
第38页
· 突变体在不同碳源固体培养基上的生长能力
第38-43页
· 突变体在查比克培养基中产孢量的检测结果
第43-47页
· 大丽轮枝菌突变体致病性鉴定结果
第47-53页
· 讨论
第53-54页
第五章 突变体插入定位初步探索
第54-61页
· 引言
第54-55页
· 实验材料
第55页
· 实验方法
第55-57页
· 实验结果
第57-60页
· TAIL-PCR 扩增结果
第57页
· 突变体T-DNA 侧翼序列的分析
第57-60页
· 讨论
第60-61页
第六章 全文结论
第61-62页
· 结论
第61页
· 后续工作
第61-62页
参考文献
第62-68页
附录1 常用培养基及抗生素的配制
第68-71页
附录2 突变体侧翼序列
第71-76页
致谢
第76-77页
作者简历
第77页
本篇论文共
77
页,
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