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大丽轮枝菌Vd991 T-DNA插入突变体库的构建及致病相关基因的筛选

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大丽轮枝菌Vd991 T-DNA插入突变体库的构建及致病相关基因的筛选
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 绪论第12-19页
  · 黄萎病第12-13页
    · 黄萎病菌第12-13页
    · 黄萎病发病特征第13页
  · 大丽轮枝菌致病机理研究进展第13-15页
    · 大丽轮枝菌致病机理假说第13-14页
    · 大丽轮枝菌致病分子机理第14-15页
  · 农杆菌介导的真菌遗传转化第15-18页
    · 传统真菌遗传转化技术第15-16页
    · 农杆菌介导的真菌遗传转化机理第16-18页
    · 利用插入突变标记、克隆相关基因第18页
  · 本研究的实验目的和意义第18-19页
第二章 大丽轮枝菌遗传转化双元载体的构建第19-27页
  · 实验材料第19-20页
    · 菌株和质粒第19-20页
    · 实验仪器第20页
    · 实验试剂第20页
    · 实验所用抗生素及其浓度第20页
  · 实验方法第20-24页
    · 质粒提取(碱裂解法)第20-21页
    · 琼脂糖凝胶电泳第21页
    · 琼脂糖凝胶回收第21-22页
    · 酶切反应第22页
    · 目的片段PCR 扩增第22-23页
    · PCR 产物纯化第23页
    · DNA 片段连接第23页
    · 大肠杆菌转化(热激转化法)第23-24页
    · 用于CaCl_2 转化法的农杆菌感受态细胞的制备第24页
    · 农杆菌转化(热激转化法)第24页
  · 实验结果第24-26页
  · 讨论第26-27页
第三章 大丽轮枝菌T-DNA 突变体库的构建第27-35页
  · 实验材料第27页
    · 实验菌株第27页
    · 实验试剂第27页
    · 实验仪器第27页
  · 实验方法第27-29页
    · 大丽轮枝菌对潮霉素的抗性检测第27页
    · 大丽轮枝菌的遗传转化第27-28页
    · 用于PCR 检测的真菌DNA 快速提取方法第28-29页
    · 大丽轮枝菌突变体PCR 分子验证第29页
    · 突变体潮霉素抗性表达的稳定性实验第29页
  · 实验结果第29-33页
    · 大丽轮枝菌对潮霉素的抗性检测第29-30页
    · 转化条件的优化第30-32页
    · 大丽轮枝菌的遗传转化第32页
    · 突变体PCR 分子验证结果第32-33页
    · 突变体潮霉素抗性表达的稳定性实验第33页
  · 讨论第33-35页
第四章 部分突变体表型鉴定与分析第35-54页
  · 实验材料第35页
    · 实验菌株第35页
    · 实验试剂第35页
    · 实验仪器第35页
    · 培养基及培养条件第35页
  · 实验方法第35-38页
    · 突变体产孢量的检测第35页
    · 突变体在培养基上生长直径的检测第35-36页
    · 大丽轮枝菌随机插入突变体致病性鉴定第36-38页
  · 实验结果第38-53页
    · 突变体在不同培养基中菌落形态的检测结果第38页
    · 突变体在不同碳源固体培养基上的生长能力第38-43页
    · 突变体在查比克培养基中产孢量的检测结果第43-47页
    · 大丽轮枝菌突变体致病性鉴定结果第47-53页
  · 讨论第53-54页
第五章 突变体插入定位初步探索第54-61页
  · 引言第54-55页
  · 实验材料第55页
  · 实验方法第55-57页
  · 实验结果第57-60页
    · TAIL-PCR 扩增结果第57页
    · 突变体T-DNA 侧翼序列的分析第57-60页
  · 讨论第60-61页
第六章 全文结论第61-62页
  · 结论第61页
  · 后续工作第61-62页
参考文献第62-68页
附录1 常用培养基及抗生素的配制第68-71页
附录2 突变体侧翼序列第71-76页
致谢第76-77页
作者简历第77页

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