论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| · 禽流感及其危害 | 第14页 |
| · 转基因植物标记基因研究概况 | 第14-18页 |
| · 传统的选择标记基因 | 第16页 |
| · 生物安全标记基因 | 第16-18页 |
| · 磷酸甘露糖异构酶基因在转基因植物中的研究进展 | 第18-24页 |
| · PMI 作用原理 | 第18页 |
| · PMI 安全性评价 | 第18-19页 |
| · PMI 基因作为选择标记在转基因植物中的应用 | 第19-23页 |
| · 影响PMI/甘露糖筛选体系转化效率的因素 | 第23页 |
| · 转基因植株中PMI 基因的检测 | 第23-24页 |
| · PMI 作为选择标记存在的问题与不足 | 第24页 |
| · 提高植物疫苗外源蛋白表达量的研究进展 | 第24-31页 |
| · 植物种类的选择 | 第25页 |
| · 表达组织的选择 | 第25页 |
| · 植物表达载体的构建 | 第25-31页 |
| · 目的与意义 | 第31页 |
| · 研究内容 | 第31-32页 |
| 第二章 PMI 体系的建立 | 第32-59页 |
| · 材料 | 第32-38页 |
| · 植物材料 | 第32页 |
| · 菌种及质粒 | 第32页 |
| · 培养基 | 第32-33页 |
| · 酶及试剂 | 第33-34页 |
| · 主要仪器 | 第34页 |
| · 引物与测序 | 第34页 |
| · 主要溶液 | 第34-38页 |
| · 方法 | 第38-49页 |
| · 百脉根对甘露糖敏感性的测定 | 第38-39页 |
| · pCAMBIA1302- PMI 植物表达载体的构建 | 第39-43页 |
| · pCAMBIA1302- PMI 农杆菌转化百脉根及再生植株的获得 | 第43-44页 |
| · 百脉根植株的PCR 分子鉴定 | 第44-45页 |
| · 百脉根植株的Southern-blot 检测 | 第45-47页 |
| · 百脉根植株的RT-PCR 检测 | 第47-48页 |
| · 氯酚红检测PMI 活性 | 第48-49页 |
| · 结果与分析 | 第49-57页 |
| · 百脉根对甘露糖的耐受浓度 | 第49-53页 |
| · pCAMBIA1302- PMI 植物表达载体的构建 | 第53页 |
| · pCAMBIA1302- PMI 植物表达载体转化百脉根 | 第53-54页 |
| · pCAMBIA1302- PMI 转基因植株的分子鉴定 | 第54-56页 |
| · 氯酚红检测（Chlorphenol red assay） | 第56-57页 |
| · 讨论 | 第57-58页 |
| · 小结 | 第58-59页 |
| 第三章 植物高效融合表达载体的构建 | 第59-66页 |
| · 材料 | 第59-60页 |
| · 菌种及质粒 | 第59页 |
| · 培养基 | 第59页 |
| · 酶及试剂 | 第59页 |
| · 引物与测序 | 第59-60页 |
| · 主要溶液 | 第60页 |
| · 方法 | 第60-61页 |
| · 酶切反应 | 第60页 |
| · 目的片段与pBI121 载体的连接反应 | 第60-61页 |
| · 大肠杆菌的转化 | 第61页 |
| · 结果及分析 | 第61-64页 |
| · 重组载体pMD-19T-MHA 和pMD-19T-MLTB 的构建 | 第61-62页 |
| · 重组载体pBI121-MLTB-MHA 的构建 | 第62页 |
| · 重组载体pCAMBIA1302-PMI-MLTB-MHA 的构建 | 第62-63页 |
| · 重组载体pCAMBIA1302-PMI-MLTB-MHA-Mars 的构建 | 第63-64页 |
| · 讨论 | 第64-65页 |
| · 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 转MHA-MLTB 基因百脉根的获得及鉴定 | 第66-75页 |
| · 材料 | 第66-67页 |
| · 植物材料 | 第66页 |
| · 菌种及质粒 | 第66页 |
| · 培养基 | 第66页 |
| · 生化试剂 | 第66页 |
| · 探针引物 | 第66-67页 |
| · 仪器 | 第67页 |
| · 主要溶液 | 第67页 |
| · 方法 | 第67-68页 |
| · 以PMI 为选择标记的百脉根遗传转化 | 第67-68页 |
| · 抗性植株的PCR 分子鉴定 | 第68页 |
| · 百脉根植株的Southern-blot 检测 | 第68页 |
| · 结果及分析 | 第68-74页 |
| · pCAMBIA1302-PMI-MLTB-MHA-Mars 转入农杆菌PCR 鉴定 | 第68页 |
| · 以PMI 为选择标记的百脉根遗传转化 | 第68-69页 |
| · pCAMBIA1302-PMI-MLTB-MHA-Mars 转基因植株的PCR 检测 | 第69-71页 |
| · 基因组DNA 的提取及PCR-Southern 检测 | 第71-72页 |
| · RNA 的提取及RT-PCR 检测 | 第72-74页 |
| · 氯酚红检测（Chlorphenol red assay） | 第74页 |
| · 小结 | 第74-75页 |
| 第五章 结论 | 第75-77页 |
| · 结论 | 第75页 |
| · 创新点 | 第75-76页 |
| · 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 作者简历 | 第86页 |
