论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 综述 弯曲菌检测技术研究进展 | 第11-20页 |
| 1 传统的检测方法 | 第11-13页 |
| · 基于生化反应的常规检测方法 | 第11-12页 |
| · MPN法 | 第12-13页 |
| · 平板菌落计数法 | 第13页 |
| · 螺旋接种法 | 第13页 |
| 2 免疫学检测方法 | 第13-14页 |
| 3 分子生物学检测方法 | 第14-18页 |
| · 核酸探针检测技术 | 第14页 |
| · NASBA技术 | 第14-15页 |
| · DNA环介导恒温扩增技术 | 第15页 |
| · PCR技术 | 第15-18页 |
| · 常规PCR方法 | 第15页 |
| · 多重PCR方法 | 第15页 |
| · PCR-ELISA方法 | 第15-16页 |
| · 巢式PCR方法 | 第16页 |
| · 磁捕获-PCR方法 | 第16页 |
| · 荧光定量PCR方法 | 第16-18页 |
| 4 展望 | 第18-20页 |
| 第二章 弯曲菌real-time PCR技术的建立及多种定量检测方法的比较 | 第20-44页 |
| 1 材料 | 第20-22页 |
| · 仪器与试剂 | 第20-21页 |
| · 菌株 | 第21页 |
| · 分子生物学软件 | 第21页 |
| · 鸡肉淋洗样品采集与处理 | 第21页 |
| · 鸡肉擦拭样品采集与处理 | 第21-22页 |
| · 鸡肛拭样品采集与处理 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-30页 |
| · 弯曲菌荧光定量PCR检测方法的建立 | 第22-25页 |
| · 引物、探针的设计与合成 | 第22页 |
| · 荧光定量PCR反应体系 | 第22页 |
| · 标准曲线的制备 | 第22-23页 |
| · 特异性试验 | 第23页 |
| · 灵敏性试验 | 第23页 |
| · 重复性试验 | 第23页 |
| · 模板DNA制备 | 第23-25页 |
| · 模拟样品弯曲菌DNA回收效率试验 | 第25页 |
| · 选择性CCDA平板菌落计数法 | 第25-26页 |
| · 选择性CCDA平板定量检测方法 | 第25-26页 |
| · 选择性CCDA平板定量检测方法的优化 | 第26页 |
| · Karmali平板菌落计数法 | 第26-27页 |
| · 试剂和选择性培养基Karmali的配制 | 第26-27页 |
| · 可疑弯曲菌菌落形态 | 第27页 |
| · 弯曲菌鉴定 | 第27-29页 |
| · 平板菌落计数法弯曲菌鉴定 | 第27-28页 |
| · 国标方法鉴定弯曲菌 | 第28-29页 |
| 2.5 real-time PCR法、选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测整鸡淋洗样品中弯曲菌的比较 | 第29页 |
| 2.6 real-time PCR法与选择性CCDA平板菌落计数法检测鸡肉擦拭和肛拭样品中弯曲菌的比较 | 第29-30页 |
| · 选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测鸡肛拭样品中弯曲菌的比较 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-39页 |
| · 弯曲菌荧光定量PCR检测方法的建立 | 第30-34页 |
| · 实时荧光定量PCR标准曲线的制备 | 第30-31页 |
| · 实时荧光定量PCR的特异性试验 | 第31页 |
| · 实时荧光定量PCR的灵敏度试验 | 第31-32页 |
| · 实时荧光定量PCR的重复性试验 | 第32页 |
| · DNA模板的制备 | 第32-33页 |
| · 模拟样品弯曲菌DNA回收效率试验 | 第33-34页 |
| · 弯曲菌选择性CCDA平板定量检测方法的优化 | 第34-35页 |
| · 不同浓度抗生素CCDA培养基分离禽肉中弯曲菌的效果比较 | 第34-35页 |
| · 弯曲菌定量检测方法计数的吻合度 | 第35页 |
| 3.3 real-time PCR法、选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测整鸡淋洗样品中弯曲菌的比较 | 第35-36页 |
| 3.4 real-time PCR法与选择性CCDA平板菌落计数法检测鸡肉擦拭和肛拭样品中弯曲菌的比较 | 第36-38页 |
| · 选择性CCDA平板菌落计数法与Karmali平板菌落计数法检测鸡肛拭样品中弯曲菌的比较 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 致谢 | 第47-48
页 |
