论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 副黏病毒P基因编码蛋白拮抗干扰素机制研究进展 | 第12-22页 |
| 1 副黏病毒P基因 | 第12-15页 |
| · 副黏病毒P基因及其编码产物 | 第12-14页 |
| · P基因编码蛋白的功能 | 第14-15页 |
| 2 干扰素信号通路与病毒拮抗干扰素机制 | 第15-22页 |
| · 干扰素系统 | 第15-16页 |
| · 干扰素信号通路 | 第16-17页 |
| · IFN的抗病毒作用 | 第17-18页 |
| · 副黏病毒V蛋白拮抗IFN机制 | 第18-22页 |
| 第二章 三种基因型NDVP/V/W真核表达质粒构建及多克隆抗体的制备 | 第22-33页 |
| 1 材料和方法 | 第22-26页 |
| · 质粒和细胞 | 第22-23页 |
| · 载体和主要试剂 | 第23页 |
| 1.3 9a5b V蛋白和ZJ1V蛋白CTD端引物设计及基因扩增 | 第23-24页 |
| 1.4 9a5b V蛋白原核表达、纯化及鼠多抗制备 | 第24页 |
| 1.5 ZJ1 V蛋白CTD原核表达、纯化及鼠多抗制备 | 第24页 |
| 1.6 9a5b、La Sota和ZJ1 V及W蛋白真核表达质粒构建 | 第24-25页 |
| · V蛋白多克隆抗体反应性测定 | 第25-26页 |
| · V蛋白在感染细胞中的表达 | 第26页 |
| 2 结果 | 第26-31页 |
| 2.1 9a5b V蛋白表达及多克隆抗体制备及检测 | 第26-27页 |
| · ZJ1毒株V蛋白CTD多克隆抗体制备及检测 | 第27-29页 |
| 2.3 9a5b、La Sota和ZJ1 V及W蛋白真核表达质粒构建 | 第29页 |
| · V蛋白表达检测 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 NDV V蛋白介导STAT1降解的毒株差异分析 | 第33-40页 |
| 1 材料和方法 | 第33-35页 |
| · 毒株和细胞系 | 第33页 |
| · 试剂和仪器 | 第33-34页 |
| · NDV感染HeLa和Vero细胞 | 第34页 |
| 1.4 9a5b、La Sota和ZJ1 V蛋白真核表达载体转染Vero细胞 | 第34页 |
| · V蛋白真核表达载体转染及NDV共感染Vero细胞 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-39页 |
| · NDV感染HeLa和Vero细胞 | 第35-36页 |
| 2.2 9a5b、La Sota和ZJ1 V蛋白真核表达载体转染Vero细胞 | 第36-37页 |
| · V蛋白真核表达载体转染及NDV共感染Vero细胞 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 NDVP基因编码蛋白对STAT1磷酸化水平的影响及反向遗传毒株验证 | 第40-55页 |
| 1 材料和方法 | 第40-43页 |
| · 毒株和细胞 | 第40-41页 |
| · 抗体和主要试剂 | 第41页 |
| · IFN-α诱导STAT1磷酸化实验 | 第41页 |
| · NDV感染细胞中IFN-Ⅰ诱导p-STAT1表达水平检测 | 第41-42页 |
| · NDV感染细胞中IFN-Ⅱ诱导p-STAT1表达水平检测 | 第42页 |
| 1.6 Ub E1抑制剂最佳使用浓度测定 | 第42页 |
| 1.7 Ub E1抑制剂抑制p-STAT1降解实验 | 第42页 |
| · NDV真核表达质粒转染细胞后p-STAT1检测 | 第42-43页 |
| 2 结果 | 第43-52页 |
| · IFN-α刺激和NDV感染早期STAT1磷酸化水平比较 | 第43-44页 |
| 2.2 NDV La Sota感染细胞后p-STAT1水平检测 | 第44-45页 |
| 2.3 NDV ZJ1感染细胞后p-STAT1水平检测 | 第45-46页 |
| · V蛋白缺失株ZJ1-Vs对p-STAT1的影响 | 第46-48页 |
| · NDV对感染细胞中IFN-Ⅱ诱导p-STAT1水平的影响 | 第48-49页 |
| 2.6 Ub E1抑制剂最佳使用浓度测定 | 第49-50页 |
| 2.7 Ub E1抑制剂抑制p-STAT1降解 | 第50页 |
| · NDV真核表达质粒转染细胞后p-STAT1检测 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 全文小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第64-65
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