木聚糖酶的克隆表达及初步应用的研究
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木聚糖酶的克隆表达及初步应用的研究
论文目录
摘要
第1-8页
Abstract
第8-9页
第一章 文献综述
第9-14页
1 木聚糖酶概述
第9-14页
· 概念
第9页
· 结构特点
第9页
· 酶学性质
第9-10页
· 温度的影响
第9-10页
· pH 的影响
第10页
· 木聚糖酶的发酵生产
第10-11页
· 菌种选择
第10页
· 诱导培养基的选择
第10-11页
· 分离纯化
第11页
· 木聚糖酶基因的诱导和表达
第11-12页
· 木聚糖酶酶的诱导和表达
第11页
· 原核微生物表达
第11页
· 真核微生物表达
第11-12页
· 木聚糖酶的应用现状
第12-14页
· 造纸工业
第12页
· 动物饲料工业
第12-13页
· 酒精发酵工业
第13-14页
第二章 木聚糖酶基因在两种不同表达体系中的表达
第14-44页
1 材料和方法
第14-24页
· 菌株和质粒
第14-15页
· 培养基及其有关溶液的配制
第15-16页
· 酵母表达贮存液配制
第15页
· 常用培养基的制备
第15-16页
· 试剂和仪器
第16-17页
· 实验方法
第17-24页
· 原核表达载体的构建
第17页
· 真核表达载体的构建
第17-20页
· 转化
第20-22页
· 转化子的筛选与鉴定
第22-23页
· 工程菌的培养和目的蛋白酶的诱导
第23页
· 表达产物的活性检测及 SDS-PAGE 分析
第23-24页
2 结果和讨论
第24-43页
· 原核表达载体的构建
第24-27页
· 表达载体菌液 PCR
第25页
· 表达载体酶切验证
第25-26页
· 重组基因在大肠杆菌中的表达
第26-27页
· 酵母表达载体的构建
第27-32页
· 酵母的转化和鉴定
第32-37页
· 酵母的转化
第32-35页
· 酵母转化子的 PCR 鉴定
第35-37页
· 木聚糖酶酶活测定和 SDS-PAGE
第37-42页
· 木聚糖酶的酶活测定
第37-42页
· 讨论
第42-43页
· 酵母 GS115 表达的目的蛋白酶活性(DNS 法)
第42页
· 目的蛋白酶分泌量和表观分子量
第42页
· 原因分析
第42-43页
3 小结
第43-44页
第三章 木聚糖酶的纯化及其纸浆预漂白中的应用
第44-65页
1 材料与方法
第44-49页
· 实验材料
第44-45页
· 实验菌株
第44页
· 纸浆
第44页
· 仪器与试剂
第44-45页
· 实验方法
第45-49页
· 各种培养基配制
第45页
· DNS 法测定酶活
第45-46页
· 发酵液中蛋白酶含量的测定
第46页
· 标准曲线的绘制
第46-47页
· 木聚糖酶的分离与纯化
第47页
· SDS-PAGE 及酶谱分析
第47-48页
· 木聚糖酶预漂白处理纸浆
第48页
· 碱抽提(E)处理
第48页
· 结合过氧化氢(H2O2)的漂白
第48-49页
· 纸张样品抄取
第49页
· 纸张物理指测定方法
第49页
2 结果与分析
第49-64页
· 木聚糖酶的制备
第49页
· 木聚糖酶的酶活测定
第49-50页
· 木聚糖酶的分离纯化
第50-51页
· 木聚糖酶的 SDS-PAGE 和酶谱分析
第50-51页
· 纸张各项物理指标的检测
第51-63页
· 不同 pH 对过氧化氢漂白后纸张各项物理指标的影响
第51-53页
· 不同温度对过氧化氢漂后纸张各项物理指标的影响
第53-56页
· 不同时间对过氧化氢漂白后纸张各项物理指标的影响
第56-58页
· 不同酶添加量对过氧化氢漂后纸张各项物理指标的影响
第58-60页
· 不同预漂白处理条件对过氧化氢漂后纸张单一指标的影响比较
第60-63页
· 讨论
第63-64页
3 小结
第64-65页
参考文献
第65-68页
致谢
第68页
本篇论文共
68
页,
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