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新型抗虫ω-芋螺毒素基因MiEN的克隆

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新型抗虫ω-芋螺毒素基因MiEN的克隆
论文目录
 
摘要第1-4 页
ABSTRACT第4-8 页
1 前言第8-31 页
  · 芋螺第8-12 页
    · 芋螺进入人类历史第8-9 页
    · 芋螺生物学特征第9-11 页
    · 芋螺的进化第11 页
    · 芋螺资源第11-12 页
  · 芋螺毒素第12-16 页
    · 生物化学第12-13 页
    · 分子生物学第13-14 页
    · 分类和命名第14-16 页
    · 应用领域第16 页
  · 芋螺毒素的药理学活性第16-26 页
    · 电压门控离子通道阻断剂第16-22 页
    · 配体门控离子通道阻断剂第22-25 页
    · 其它第25-26 页
  · 芋螺毒素研究现状第26-28 页
  · 展望第28-29 页
  · 本研究的目的和意义第29-30 页
  · 本研究的技术路线第30-31 页
2 材料与方法第31-43 页
  · 材料第31 页
    · 芋螺材料第31 页
    · 菌种第31 页
    · 生化试剂第31 页
    · 仪器第31 页
  · 方法第31-43 页
    · 芋螺解剖第31 页
    · 勇士芋螺毒管总RNA的提取第31-33 页
    · 勇士芋螺DNA提取方法的优化第33-35 页
    · 勇士芋螺总DNA的酶解第35 页
    · 勇士芋螺RNA反转录合成cDNA第35 页
    · ω-芋螺毒素MiEN基因组基因的PCR扩增第35-36 页
    · ω-芋螺毒素基因MiEN cDNA的3’-RACE扩增第36-37 页
    · PCR产物的回收第37 页
    · PCR产物的克隆第37-40 页
    · 重组子测序第40 页
    · 测序后重组质粒的中量提取第40 页
    · 测序后重组质粒酶切和PCR鉴定第40-41 页
    · 测序后重组质粒的保存第41 页
    · 序列分析第41 页
    · ω-芋螺毒素MiEM的合成、氧化复性和分离纯化第41 页
    · 活性鉴定第41-43 页
3 结果与分析第43-53 页
  · 勇士芋螺形态特征和毒管解剖第43 页
  · 勇士芋螺毒管总RNA的提取效果第43-44 页
  · 勇士芋螺毒管cDNA合成的效果第44-45 页
  · 勇士芋螺基因组DNA提取效果第45-48 页
    · 四种提取方法的比较第45-47 页
    · 勇士芋螺不同组织器官的DNA含量第47-48 页
  · ω-芋螺毒素基因组基因MiENG的PCR扩增第48-49 页
  · ω-芋螺毒素cDNAMiEN的PCR扩增第49 页
  · MiEN基因的序列分析第49-52 页
  · 毒素MiEM的化学合成和氧化折叠纯化第52 页
  · 毒素MiEM的抗虫活性第52-53 页
4 讨论第53-56 页
  · 关于克隆芋螺毒素基因组基因的模板问题第53 页
  · 关于用3’-RACE克隆芋螺毒素cDNA的问题第53-54 页
  · ω-芋螺毒素新基因克隆的策略第54-55 页
  · 抗虫ω-芋螺毒素的应用前景及研究展望第55-56 页
5 结论第56-57 页
参考文献第57-66 页
致谢第66页

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