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白菜型冬油菜抗冻蛋白的分离及BrAFP1基因克隆与功能分析

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白菜型冬油菜抗冻蛋白的分离及BrAFP1基因克隆与功能分析
论文目录
 
摘要第1-4页
Summary第4-7页
缩略词表第7-11页
第一章 文献综述第11-21页
    1.1 研究意义第11-12页
    1.2 低温胁迫对植物生长发育的影响第12-14页
        1.2.1 低温胁迫对植物形态的影响第12页
        1.2.2 低温胁迫下植物生理指标的变化第12-13页
        1.2.3 低温胁迫对气孔运动的影响第13页
        1.2.4 低温胁迫对植物光合作用的影响第13-14页
    1.3 AFPs的分类与特点第14页
    1.4 国内外研究现状及发展动态第14-18页
        1.4.1 植物AFPs的分离鉴定与性质第14-15页
        1.4.2 植物AFPs的分子结构第15-16页
        1.4.3 植物AFPs的作用机理第16-17页
        1.4.4 植物应答低温的分子调控网络第17-18页
        1.4.5 转AFPs基因可显著提高冷敏感植物抗寒性第18页
    1.5 本研究的目的与内容第18-19页
        1.5.1 本研究的目的第18-19页
        1.5.2 本研究的主要内容第19页
        1.5.3 拟解决的科学问题第19页
        1.5.4 论文特色与创新第19页
    1.6 技术路线第19-21页
第二章 不同白菜型冬油菜在低温处理后生理与光合特征的变化第21-44页
    2.1 材料与方法第21-22页
        2.1.1 试验材料第21-22页
        2.1.2 试验处理第22页
    2.2 试验方法第22-24页
        2.2.1 形态观察第23页
        2.2.2 生理指标的测定第23页
        2.2.3 叶片气孔形态观察第23页
        2.2.4 叶绿体超微结构观察第23页
        2.2.5 光合参数测定第23页
        2.2.6 叶绿素含量的测定第23页
        2.2.7 根系表面积的测定第23-24页
    2.3 药品及仪器第24页
        2.3.1 药品第24页
        2.3.2 仪器第24页
    2.4 数据处理第24页
    2.5 结果与分析第24-42页
        2.5.1 低温对不同抗寒性白菜型冬油菜形态、生理与光合的影响第24-33页
        2.5.2 不同低温对白菜型冬油菜生理与光合特征的影响第33-36页
        2.5.3 低温处理时长对白菜型冬油菜生理与光合特征的影响第36-39页
        2.5.4 低温对白菜型冬油菜气孔形态及叶绿体超微结构的影响第39-42页
    2.6 讨论与结论第41-44页
第三章 白菜型冬油菜BrAFP分离鉴定及其基因克隆与低温表达特性第44-59页
    3.1 材料与方法第45-49页
        3.1.1 供试材料第45页
        3.1.2 试验方法第45-46页
        3.1.3 RNA的提取及反转录第46页
        3.1.4 引物设计与β-1,3-葡聚糖酶基因克隆第46-47页
        3.1.5 β-1,3-葡聚糖酶预测蛋白的生物信息学分析第47页
        3.1.6 白菜型冬油菜β-1,3-葡聚糖酶在低温胁迫下的表达量第47-48页
        3.1.7 亚细胞定位载体构建第48-49页
    3.2 结果与分析第49-56页
        3.2.1 低温胁迫后白菜型冬油菜叶片全蛋白粗体液中存在高活性AFP第49页
        3.2.2 38 KD条带蛋白回收纯化液具有AFP活性第49-50页
        3.2.3 β-1,3-葡聚糖酶是白菜型冬油菜中的一种抗冻蛋白第50-51页
        3.2.4 BrAFP1基因克隆及蛋白结构的生物信息学分析第51-53页
        3.2.5 白菜型冬油菜BrAFP1氨基酸同源性和系统进化分析第53-55页
        3.2.6 BrAFP1亚细胞定位载体构建第55页
        3.2.7 β-1,3-葡聚糖酶亚细胞定位观察第55页
        3.2.8 低温胁迫下BrAFP1基因的表达分析第55-56页
    3.3 讨论第56-57页
    3.4 结论第57-59页
第四章 白菜型冬油菜BrAFP1基因遗传转化与功能验证第59-73页
    4.1 材料与方法第59-64页
        4.1.1 试验材料第59页
        4.1.2 植物材料的培养与处理第59-60页
        4.1.3 BrAFP1过表达载体的构建与遗传转化第60-61页
        4.1.4 花絮浸染法转化拟南芥与阳性植株筛选第61-63页
        4.1.5 转基因植株和突变体株系基因表达第63页
        4.1.6 植物材料的抗寒性鉴定第63-64页
    4.2 结果与分析第64-71页
        4.2.1 β-1,3-葡聚糖酶基因克隆第64页
        4.2.2 BrAFP1基因的过表达载体构建第64-65页
        4.2.3 拟南芥过表达株系鉴定与筛选第65-66页
        4.2.4 低温胁迫下过表达植株BrAFP1的表达分析第66-67页
        4.2.5 BrAFP1过表达拟南芥株系的抗寒性鉴定第67-69页
        4.2.6 拟南芥突变体afp1的抗寒性鉴定第69-71页
    4.3 结果与分析第71-73页
第五章 不同抗寒白菜型冬油菜BrAFP1基因克隆及低温对其表达的时空特征分析第73-89页
    5.1 材料与方法第73-76页
        5.1.1 试验材料第73页
        5.1.2 试验处理第73-74页
        5.1.3 BrAFP1基因克隆第74-76页
    5.2 结果与分析第76-86页
        5.2.1 RNA、DNA提取物完整性检测第77页
        5.2.2 qPCR定量引物扩增特异性检测第77-78页
        5.2.3 BrAFP1基因的克隆第78-80页
        5.2.4 不同抗寒白菜型BrAFP1基因序列及其编码序列比对分析第80-82页
        5.2.5 BrAFP1基因表达的时空特征分析第82-85页
        5.2.6 低温下白菜型冬油菜冷应答相关基因表达特征分析第85-86页
    5.3 讨论与结论第86-89页
第六章 全文总结第89-91页
参考文献第91-101页
致谢第101-102页
作者简介第102-103页
导师简介第103-104页

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