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马动脉炎病毒核酸与蛋白定量检测方法的建立

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马动脉炎病毒核酸与蛋白定量检测方法的建立
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-10页
1 引言第10-17页
  · 马病毒性动脉炎概述第10页
  · EAV病原学第10-11页
    · EAV病毒形态学第10页
    · EAV的基因组结构第10-11页
    · EAV ORFs编码的蛋白及其分子生物学功能第11页
  · EAV的流行病学第11页
  · EAV的临床症状第11-12页
  · EAV的诊断第12-14页
    · 临床诊断第12页
    · EAV的分离与鉴定第12页
    · 血清学诊断第12-13页
    · 分子生物学诊断第13-14页
  · EAV疫苗研究第14-16页
    · 弱毒苗第14-15页
    · 灭活苗第15页
    · 基因工程疫苗第15页
    · 亚单位疫苗第15-16页
  · EAV的预防第16页
    · 加强饲养管理第16页
    · 加强检疫第16页
  · EAV的治疗第16页
  · 本研究的目的和意义第16-17页
2 材料与方法第17-23页
  · 材料第17-20页
    · 病毒、细胞及试验动物第17页
    · 主要试剂第17-18页
    · 主要溶液和培养基的配制第18页
    · 主要仪器第18-19页
    · 病毒标准品及检测抗体的标记第19页
    · 杂交瘤细胞2B3和2B9的复苏及培养第19页
    · MAb 2B3和MAb 2B9的制备第19页
    · MAb 2B3和MAb 2B9的纯化第19页
    · MAb 2B3和MAb 2B9特性鉴定第19-20页
  · EAV AC-ELISA方法的建立第20-21页
    · 操作程序第20页
    · 确定最佳反应条件第20-21页
    · 确定临界值判定标准第21页
    · 建立AC-ELISA方法的标准曲线第21页
    · AC-ELISA方法的评价第21页
    · AC-ELISA方法的应用第21页
  · EAV Eva Green荧光定量RT-PCR方法的建立第21-23页
    · 引物设计第21-22页
    · 病毒RNA的提取与cDNA合成第22页
    · 目的基因的克隆与标准质粒的构建第22页
    · 反应体系和程序第22页
    · 标准曲线的建立第22页
    · 荧光定量RT-PCR方法的评价第22-23页
    · 荧光定量RT-PCR方法的应用第23页
3 结果第23-33页
  · MAb 2B3和MAb 2B9特性鉴定第23-24页
    · Western blot(WB)鉴定第23-24页
    · IFA鉴定第24页
  · EAV AC-ELISA方法第24-28页
    · AC-ELISA检测方法反应条件的优化第24-25页
    · AC-ELISA的判定标准第25页
    · AC-ELISA方法的标准曲线第25页
    · AC-ELISA方法的特异性试验第25-26页
    · AC-ELISA方法的敏感性试验第26-27页
    · AC-ELISA方法的重复性试验第27-28页
    · AC-ELISA方法的应用第28页
  · EAV Eva Green荧光定量RT-PCR方法的建立与初步应用第28-33页
    · 荧光定量RT-PCR的标准质粒第28-29页
    · 荧光定量RT-PCR方法的标准曲线第29-30页
    · 荧光定量RT-PCR方法的特异性试验第30页
    · 荧光定量RT-PCR方法的敏感性试验第30-32页
    · 荧光定量RT-PCR方法的重复性试验第32页
    · 不同时间点病毒上清液的TCID_(50)测定及荧光定量RT-PCR扩增第32-33页
4 讨论第33-35页
  · EAV AC-ELISA定量检测方法第33-34页
  · EAV Eva Green荧光定量RT-PCR检测方法第34-35页
5 结论第35-36页
致谢第36-37页
参考文献第37-43页
作者简介第43页

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