马动脉炎病毒核酸与蛋白定量检测方法的建立
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马动脉炎病毒核酸与蛋白定量检测方法的建立
论文目录
摘要
第1-4页
Abstract
第4-10页
1 引言
第10-17页
· 马病毒性动脉炎概述
第10页
· EAV病原学
第10-11页
· EAV病毒形态学
第10页
· EAV的基因组结构
第10-11页
· EAV ORFs编码的蛋白及其分子生物学功能
第11页
· EAV的流行病学
第11页
· EAV的临床症状
第11-12页
· EAV的诊断
第12-14页
· 临床诊断
第12页
· EAV的分离与鉴定
第12页
· 血清学诊断
第12-13页
· 分子生物学诊断
第13-14页
· EAV疫苗研究
第14-16页
· 弱毒苗
第14-15页
· 灭活苗
第15页
· 基因工程疫苗
第15页
· 亚单位疫苗
第15-16页
· EAV的预防
第16页
· 加强饲养管理
第16页
· 加强检疫
第16页
· EAV的治疗
第16页
· 本研究的目的和意义
第16-17页
2 材料与方法
第17-23页
· 材料
第17-20页
· 病毒、细胞及试验动物
第17页
· 主要试剂
第17-18页
· 主要溶液和培养基的配制
第18页
· 主要仪器
第18-19页
· 病毒标准品及检测抗体的标记
第19页
· 杂交瘤细胞2B3和2B9的复苏及培养
第19页
· MAb 2B3和MAb 2B9的制备
第19页
· MAb 2B3和MAb 2B9的纯化
第19页
· MAb 2B3和MAb 2B9特性鉴定
第19-20页
· EAV AC-ELISA方法的建立
第20-21页
· 操作程序
第20页
· 确定最佳反应条件
第20-21页
· 确定临界值判定标准
第21页
· 建立AC-ELISA方法的标准曲线
第21页
· AC-ELISA方法的评价
第21页
· AC-ELISA方法的应用
第21页
· EAV Eva Green荧光定量RT-PCR方法的建立
第21-23页
· 引物设计
第21-22页
· 病毒RNA的提取与cDNA合成
第22页
· 目的基因的克隆与标准质粒的构建
第22页
· 反应体系和程序
第22页
· 标准曲线的建立
第22页
· 荧光定量RT-PCR方法的评价
第22-23页
· 荧光定量RT-PCR方法的应用
第23页
3 结果
第23-33页
· MAb 2B3和MAb 2B9特性鉴定
第23-24页
· Western blot(WB)鉴定
第23-24页
· IFA鉴定
第24页
· EAV AC-ELISA方法
第24-28页
· AC-ELISA检测方法反应条件的优化
第24-25页
· AC-ELISA的判定标准
第25页
· AC-ELISA方法的标准曲线
第25页
· AC-ELISA方法的特异性试验
第25-26页
· AC-ELISA方法的敏感性试验
第26-27页
· AC-ELISA方法的重复性试验
第27-28页
· AC-ELISA方法的应用
第28页
· EAV Eva Green荧光定量RT-PCR方法的建立与初步应用
第28-33页
· 荧光定量RT-PCR的标准质粒
第28-29页
· 荧光定量RT-PCR方法的标准曲线
第29-30页
· 荧光定量RT-PCR方法的特异性试验
第30页
· 荧光定量RT-PCR方法的敏感性试验
第30-32页
· 荧光定量RT-PCR方法的重复性试验
第32页
· 不同时间点病毒上清液的TCID_(50)测定及荧光定量RT-PCR扩增
第32-33页
4 讨论
第33-35页
· EAV AC-ELISA定量检测方法
第33-34页
· EAV Eva Green荧光定量RT-PCR检测方法
第34-35页
5 结论
第35-36页
致谢
第36-37页
参考文献
第37-43页
作者简介
第43页
本篇论文共
43
页,
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