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核酸酶P1在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析

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核酸酶P1在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-25页
  · 核酸酶 P1 的研究进展第11-18页
    · 核酸酶第11-16页
    · 核酸酶 P1 的发展历程及应用第16-18页
  · 毕赤酵母表达系统第18-22页
    · 启动子第19-20页
    · 标签第20-21页
    · 分泌型蛋白的翻译后修饰第21-22页
      · 分泌信号第21页
      · 二硫键形成第21页
      · O-或 N-链接的糖基化第21-22页
  · 重叠延伸 PCR 技术的发展及应用第22-23页
  · 立题依据和研究目的第23-25页
第二章 核酸酶 P1 的原核表达、纯化及活性分析第25-43页
  · 材料第25-30页
    · 质粒载体第25页
    · 宿主菌第25页
    · 实验材料及试剂盒第25页
    · 实验试剂第25-28页
    · 培养基第28-29页
    · 主要仪器第29页
    · 引物第29-30页
  · 实验方法第30-34页
    · NP1 基因的拼接第30页
    · 原核表达载体的构建第30-33页
    · 感受态细胞制备第33页
    · 重组 NP1 酶活力检测及表达条件优化第33页
    · 重组 NP1 的纯化与酶活性电泳检测第33-34页
    · 重组 NP1 的热稳定性第34页
    · 重组 NP1 的金属离子依赖性第34页
  · 结果分析第34-41页
    · NP1 基因的人工合成第34页
    · 原核表达载体的构建第34-36页
    · 重组 NP1 的表达及表达条件优化第36-37页
    · 重组 NP1 的纯化与酶活性电泳检测第37-40页
    · 重组 NP1 的热稳定性第40-41页
    · 重组 NP1 的金属离子依赖性第41页
  · 讨论第41-43页
第三章 核酸酶 P1 在毕赤酵母中的表达及活性分析第43-58页
  · 材料第43-47页
    · 质粒载体第43页
    · 宿主菌第43页
    · 实验材料及试剂盒第43页
    · 实验试剂第43-45页
    · 毕赤酵母培养基配方第45-46页
    · 主要仪器第46页
    · 引物第46-47页
  · 实验方法第47-50页
    · 重组载体的构建第47-48页
    · 重组载体电转化及阳性重组子的筛选第48-49页
      · 重组载体的线性化第48页
      · 毕赤酵母感受态细胞的制备及转化第48-49页
      · 阳性重组子的筛选第49页
    · 阳性重组子的鉴定第49页
      · 基因组 DNA 的提取第49页
      · 基因组 DNA PCR 鉴定第49页
    · 重组蛋白表达条件的优化及酶活性测定第49-50页
    · 重组蛋白的初步纯化第50页
    · 酶活性凝胶电泳检测第50页
  · 结果与分析第50-56页
    · 重组表达载体 pPIC9K-NP1-His 和 pPIC9K-MF-pre-NP1 构建第50-51页
    · 重组载体电转化及毕赤酵母阳性重组子的筛选第51-53页
    · 菌株的筛选和表达条件的优化第53-55页
    · 重组 NP1 的初步纯化第55-56页
    · 酶活性凝胶电泳检测第56页
  · 讨论第56-58页
第四章 结论与创新点第58-59页
  · 结论第58页
  · 创新点第58-59页
参考文献第59-66页
附录第66-67页
缩略词第67-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

本篇论文共70页,点击这进入下载页面
 
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