论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6
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| ABSTRACT | 第6-10
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| 第一章 绪论 | 第10-32
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| · 家蚕作为模式生物进行的研究 | 第10
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| · 转基因动物的研究进展 | 第10-17
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| · 本实验选用的昆虫转基因载体——piggyBac转座子 | 第17-21
页 |
| · piggyBac转座子的发现及其结构特征 | 第17-18
页 |
| · piggyBac转座子的切出和转座 | 第18-21
页 |
| · piggyBac转座子的切出和转座特征 | 第18
页 |
| · piggyBac转座子的切出和转座的机制 | 第18-20
页 |
| · piggyBac转座子在转基因昆虫中的应用 | 第20-21
页 |
| · 转基因蚕的研究历程 | 第21-27
页 |
| · 家蚕基因转移方法 | 第22-26
页 |
| · 显微注射法 | 第22-23
页 |
| · 基因枪导入法 | 第23-25
页 |
| · 精子介导法 | 第25
页 |
| · 其它方法 | 第25-26
页 |
| · piggyBac转座子在家蚕中的研究 | 第26-27
页 |
| · 国内外纤维素酶的研究现状 | 第27-28
页 |
| · 桑树天牛纤维素酶基因转到家蚕体内的可行性 | 第28-29
页 |
| · 构建含有桑天牛纤维素酶的转基因家蚕的意义 | 第29-30
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| · 主要的研究内容和技术路线 | 第30-32
页 |
| 第二章 桑天牛纤维素酶基因的克隆及生物信息学分析 | 第32-41
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| · 材料与方法 | 第32-33
页 |
| · 载体、菌株、数据库及主要软件 | 第32
页 |
| · 方法 | 第32-33
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| · 结果与分析 | 第33-40
页 |
| · 桑天牛纤维素酶AgEGaseI的PCR扩增及测序验证 | 第33-34
页 |
| · AgEGaseI基因的结构检测 | 第34
页 |
| · AgEGaseI氨基酸序列同源性比对结果 | 第34-38
页 |
| · 进化树分析 | 第38-39
页 |
| · AgEGaseI的3D空间结构预测 | 第39-40
页 |
| · 讨论 | 第40-41
页 |
| 第三章 桑天牛纤维素酶的真核表达及其酶活测定 | 第41-45
页 |
| · 材料和方法 | 第41-43
页 |
| · AgEGaseI引物的设计和PCR扩增 | 第41
页 |
| · 重组转移载体pFasBacHTb-AgEGaseI的构建 | 第41
页 |
| · 重组苜蓿银纹夜蛾杆状病毒bacmid-AgEGaseI的构建 | 第41-43
页 |
| · 重组Bacmid在Sf9细胞中的表达 | 第43
页 |
| · 结果与分析 | 第43-44
页 |
| · 重组转移载体pFasBacHTb-AgEGaseI的获得 | 第43
页 |
| · 重组苜蓿银纹夜蛾杆状病毒bacmid-AgEGaseI的检测 | 第43
页 |
| · AgEGaseI基因在Sf9细胞中的表达 | 第43-44
页 |
| · 纤维素酶活性的检测 | 第44
页 |
| · 讨论 | 第44-45
页 |
| 第四章 转基因载体的构建 | 第45-50
页 |
| · 材料和方法 | 第45-46
页 |
| · Bm Actin3,AgEGaseI,SV40引物设计 | 第45
页 |
| · Bm Actin3,AgEGaseI,SV40片段的PCR扩增 | 第45-46
页 |
| · pBac[3×P3-EGFPafm]plasmid与Bm Actin3,AgEGaseI,SV40片段的酶切处理与回收 | 第46
页 |
| · pBac[3×P3-EGFPafm]-AgEGaseI载体连接 | 第46-49
页 |
| · 讨论 | 第49-50
页 |
| 第五章 转基因家蚕的获得及其鉴定 | 第50-55
页 |
| · 材料与方法 | 第50-51
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| · 显微注射用蚕卵的准备 | 第50
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| · 转基因用DNA的准备 | 第50
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| · 蚕卵显微注射 | 第50-51
页 |
| · 结果与分析 | 第51-54
页 |
| · G0代家蚕中3×P3标志基因的检测 | 第51
页 |
| · RNA提取及基因组PCR分析 | 第51-53
页 |
| · 纤维素酶在家蚕体内的表达与活力测定: | 第53-54
页 |
| · 讨论 | 第54-55
页 |
| 第六章 主要工作总结与展望 | 第55-57
页 |
| · 主要工作总结 | 第55
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| · 工作展望 | 第55-57
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| 参考文献 | 第57-62
页 |
| 致谢 | 第62-63
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| 在校期间发表论文 | 第63
页 |
| 参加课题 | 第63
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