论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-21页 |
| 1 植物先天性免疫系统 | 第11-12页 |
| 2 植物病原菌效应因子 | 第12-16页 |
| 2.1 植物病原细菌Ⅲ型效应因子 | 第13-14页 |
| 2.2 真核植物病原菌效应因子 | 第14-15页 |
| 2.3 稻瘟病菌效应因子 | 第15-16页 |
| 2.4 稻瘟病菌LxAR效应因子的发现 | 第16页 |
| 3 农杆菌介导的基因瞬时表达系统 | 第16-19页 |
| 3.1 农杆菌瞬时表达原理 | 第16-17页 |
| 3.2 农杆菌介导的瞬时表达系统的优点 | 第17-18页 |
| 3.3 农杆菌瞬时表达系统的应用 | 第18-19页 |
| 4 本研究的意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-34页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| 1.1 供试菌株和植物 | 第21页 |
| 1.2 实验所用载体 | 第21页 |
| 1.3 供试生化药剂 | 第21-22页 |
| 1.4 常用培养基配方 | 第22页 |
| 1.5 常用抗生素 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.1 生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2 稻瘟病菌核酸提取 | 第23页 |
| 2.3 大肠杆菌质粒的提取 | 第23页 |
| 2.4 DNA回收 | 第23页 |
| 2.5 大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第23-24页 |
| 2.6 农杆菌感受态的制备与转化 | 第24页 |
| 2.7 植物表达载体的构建 | 第24-26页 |
| 2.8 农杆菌介导的烟草瞬时表达系统 | 第26-27页 |
| 2.9 MoLLEs在本氏烟上的亚定位 | 第27页 |
| 2.10 台盼蓝染色及DAB染色 | 第27-28页 |
| 2.11 MoLLEs基因的敲除与过表达 | 第28-31页 |
| 2.11.1 MoLLEs基因的敲除 | 第28-29页 |
| 2.11.2 MoLLEs基因过表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.11.3 稻瘟病菌原生质体的制备和转化 | 第30-31页 |
| 2.12 PCR验证转化子 | 第31页 |
| 2.13 实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第31-32页 |
| 2.14 稻瘟病菌的表型分析及致病性分析 | 第32-33页 |
| 2.14.1 稻瘟病菌菌落生长速率测定 | 第32页 |
| 2.14.2 稻瘟病菌产孢量统计 | 第32页 |
| 2.14.3 稻瘟病菌致病性分析 | 第32-33页 |
| 2.15 数据分析 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-60页 |
| 1 MoLLEs效应因子的载体构建 | 第34页 |
| 2 MoLLEs蛋白功能分析 | 第34-51页 |
| 2.1 MoLLE1 | 第34-40页 |
| 2.1.1 MoLLE1全长蛋白在本氏烟草引起HR反应而去信号肽后抑制BAX引起的HR反应 | 第34-35页 |
| 2.1.2 MoLLE1全长蛋白在水稻叶鞘引起HR反应 | 第35-36页 |
| 2.1.3 MoLLE1结构域分析 | 第36-38页 |
| 2.1.4 LxAR基序影响MoLLE1功能的发挥 | 第38-39页 |
| 2.1.5 MoLLE1基因在本氏烟上的定位 | 第39-40页 |
| 2.2 MoLLE2 | 第40-46页 |
| 2.2.1 MoLLE2去信号肽能在本氏烟草上引起HR反应而全长基因能够抑制BAX引起HR反应 | 第40-42页 |
| 2.2.2 MoLLE2去信号肽蛋白在水稻叶鞘引起HR反应 | 第42页 |
| 2.2.3 MoLLE2功能域分析 | 第42-44页 |
| 2.2.4 LxAR基序影响MoLLE2功能的发挥 | 第44-45页 |
| 2.2.5 MoLLE2在本氏烟叶片上的定位 | 第45-46页 |
| 2.3 MoLLE3 | 第46-51页 |
| 2.3.1 去信号肽后的MoLLE3蛋白抑制BAX引起HR反应 | 第46-47页 |
| 2.3.2 MoLLE3功能域分析 | 第47-48页 |
| 2.2.3 LxAR基序影响MoLLE3功能的发挥 | 第48-50页 |
| 2.3.4 MoLLE3在本氏烟上的定位 | 第50-51页 |
| 3 MoLLE1、MoLLE2、MoLLE3基因在稻瘟病菌中的功能分析 | 第51-60页 |
| 3.1 MMLLE1 | 第51-54页 |
| 3.1.1 MoLLE1敲除、过表达稻瘟病菌突变体的筛选与鉴定 | 第51-52页 |
| 3.1.2 MoLLE1敲除、过表达稻瘟病菌突变体营养生长观察 | 第52-53页 |
| 3.1.3 MoLLE1敲除及过表达突变体致病性分析 | 第53-54页 |
| 3.2 MoLLE2 | 第54-56页 |
| 3.2.1 MoLLE2过表达突变体的筛选与鉴定 | 第54-55页 |
| 3.2.2 MoLLE2过表达突变体菌落形态观察 | 第55页 |
| 3.2.3 MoLLE2过表达突变体致病性致病性分析 | 第55-56页 |
| 3.3 MoLLE3 | 第56-60页 |
| 3.3.1 MoLLE3敲除、过表达稻瘟病菌突变体的筛选与鉴定 | 第56-57页 |
| 3.3.2 MoLLE3敲除、过表达稻瘟病菌突变体营养生长观察 | 第57-58页 |
| 3.3.4 MoLLE3敲除及过表达突变体致病性致病性分析 | 第58-60页 |
| 第四章 讨论与小结 | 第60-62页 |
| 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
