论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| abstract | 第5-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-16页 |
| 1.1 弧菌及弧菌病的研究进展 | 第9页 |
| 1.1.1 概述 | 第9页 |
| 1.1.2 致病机理 | 第9页 |
| 1.2 河流弧菌的研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2.1 概述 | 第9-10页 |
| 1.2.2 河流弧菌研究现状 | 第10页 |
| 1.3 嗜水气单胞菌研究进展 | 第10-13页 |
| 1.3.1 概述 | 第10-11页 |
| 1.3.2 嗜水气单胞菌毒力因子 | 第11-13页 |
| 1.4 细菌粘附研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4.1 粘附作用 | 第13-14页 |
| 1.4.3 细菌粘附研究概况 | 第14页 |
| 1.5 转座子及转座诱变技术 | 第14-15页 |
| 1.5.1 转座子 | 第14页 |
| 1.5.2 转座标签技术 | 第14-15页 |
| 1.6 主要研究内容和研究意义 | 第15-16页 |
| 1.6.1 河流弧菌粘附缺陷突变体库的构建和突变株的筛选 | 第15页 |
| 1.6.2 河流弧菌粘附相关基因的克隆与鉴定 | 第15页 |
| 1.6.3 河流弧菌粘附相关基因功能研究 | 第15页 |
| 1.6.4 嗜水气单胞菌粘附相关基因的功能研究 | 第15-16页 |
| 第2章 河流弧菌粘附缺陷突变株的筛选 | 第16-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 实验细菌及质粒 | 第16-17页 |
| 2.1.2 培养基及培养方法 | 第17-18页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第18页 |
| 2.1.5 实验动物 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-24页 |
| 2.2.1 突变库的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.2 河流弧菌粘附缺陷突变株的筛选 | 第20页 |
| 2.2.3 突变菌株的PCR鉴定 | 第20-21页 |
| 2.2.4 基因组步移技术扩增转座子插入位点侧翼序列 | 第21-23页 |
| 2.2.5 突变株生物性状分析 | 第23-24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-27页 |
| 2.3.1 质粒的提取及转化受体菌E.coli Sm10 | 第24页 |
| 2.3.2 ELISA方法筛选河流弧菌粘附缺陷突变株 | 第24-25页 |
| 2.3.3 基因组DNA提取 | 第25页 |
| 2.3.4 突变菌株的PCR鉴定 | 第25页 |
| 2.3.5 转座子插入位点侧翼序列分析 | 第25-26页 |
| 2.3.6 生物学性状分析结果 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-29页 |
| 第3章 嗜水气单胞菌粘附相关基因的功能分析 | 第29-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 3.1.1 实验细菌及质粒 | 第29页 |
| 3.1.2 培养基及培养方法 | 第29-30页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第30页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-36页 |
| 3.2.1 嗜水气单胞菌粘附缺陷突变体库的构建和突变株的筛选 | 第30页 |
| 3.2.2 补偿株的构建 | 第30-36页 |
| 3.3 实验结果 | 第36-40页 |
| 3.3.1 基因组DNA及表达载体pACYC184提取结果 | 第36页 |
| 3.3.2 目的基因扩增及测序测定 | 第36-37页 |
| 3.3.3 目的基因及表达载体双酶切 | 第37页 |
| 3.3.4 重组质粒鉴定结果 | 第37-38页 |
| 3.3.5 western blot鉴定结果 | 第38页 |
| 3.3.6 运动性 | 第38-39页 |
| 3.3.7 体外粘附实验 | 第39页 |
| 3.3.8 生物膜形成实验 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第4章 小结与展望 | 第42-44页 |
| 4.1 主要结论 | 第42页 |
| 4.2 展望 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
