论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9
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| ABSTRACT | 第9-12
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| 英文缩略词表(ABBREVIATION) | 第12-13
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| 第1章 文献综述 | 第13-32
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| · 病毒的分类 | 第13-14
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| · 病毒的命名 | 第13
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| · 疱疹病毒和α-疱疹病毒 | 第13-14
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| · PRV的分子生物学 | 第14-23
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| · 病毒粒子的结构 | 第14
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| · 基因组和基因产物 | 第14-15
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| · 衣壳蛋白 | 第15-16
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| · 间质蛋白 | 第16
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| · 囊膜蛋白 | 第16-19
页 |
| · 在PRV感染过程中宿主转录的改变 | 第19-20
页 |
| · 在潜伏期的基因表达 | 第20
页 |
| · DNA复制 | 第20-21
页 |
| · 核酸代谢 | 第21-22
页 |
| · 衣壳的形成 | 第22-23
页 |
| · 环氧化酶和衣壳装配 | 第23
页 |
| · DNA衣壳化 | 第23
页 |
| · PRV作为一种模式病毒 | 第23-24
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| · 伪狂犬病对家畜的影响 | 第24-28
页 |
| · 历史上的发现 | 第24
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| · 在非自然宿主中伪狂犬病感染的致死性 | 第24
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| · PRV对猪的急性感染 | 第24-25
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| · PRV在猪体内的潜伏 | 第25-26
页 |
| · 修饰的活疫苗 | 第26-27
页 |
| · DNA疫苗 | 第27
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| · PRV的诊断试验 | 第27-28
页 |
| · 伪狂犬病的世界分布 | 第28
页 |
| · 哺乳动物双杂交的研究进展 | 第28-30
页 |
| · 哺乳动物双杂交的原理 | 第28
页 |
| · 杂交新的发展 | 第28-29
页 |
| · 杂交技术新的应用 | 第29-30
页 |
| · 杆状病毒简介 | 第30-32
页 |
| · 杆状病毒表达系统的研究 | 第30
页 |
| · 杆状病毒作为哺乳动物细胞表达载体的研究 | 第30-32
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| 第2章 研究目的和意义 | 第32-33
页 |
| 第3章 材料与方法 | 第33-51
页 |
| · 实验材料 | 第33-40
页 |
| · 病毒、细胞和菌株 | 第33
页 |
| · 载体与质粒 | 第33-36
页 |
| · 工具酶及主要试剂 | 第36-37
页 |
| · 主要培养基及其配制 | 第37-38
页 |
| · 缓冲液 | 第38-40
页 |
| · 实验方法 | 第40-51
页 |
| · PRV的增殖 | 第40
页 |
| · PRV基因组DNA提取 | 第40
页 |
| · PRV衣壳基因的PCR扩增 | 第40-42
页 |
| · PCR或酶切产物的回收与纯化 | 第42
页 |
| · 线性质粒DNA末端去磷酸化 | 第42
页 |
| · 外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第42-43
页 |
| · 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第43
页 |
| · 连接产物的转化 | 第43
页 |
| · 质粒的小量制备 | 第43-44
页 |
| · 质粒的大量制备 | 第44
页 |
| · 质粒DNA的定量 | 第44-45
页 |
| · 重组质粒(阳性质粒)的鉴定 | 第45
页 |
| · 诱导表达 | 第45
页 |
| · SDS-PAGE电泳 | 第45
页 |
| · Western blotting | 第45-46
页 |
| · 脂质体介导的共转染 | 第46
页 |
| · 双荧光素酶检测转染基因的相互基因 | 第46-47
页 |
| · 统计方法 | 第47
页 |
| · GST Pull-Down | 第47-48
页 |
| · 免疫共沉淀 | 第48-49
页 |
| · 重组杆状病毒的构建流程 | 第49-51
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| 第4章 结果与分析 | 第51-77
页 |
| · PRV Ea株衣壳蛋白基因的克隆与序列分析 | 第51-55
页 |
| · PRV Ea株UL19基因的克隆与序列分析 | 第51-52
页 |
| · PRV Ea株UL6基因的克隆与序列分析 | 第52
页 |
| · PRV Ea株UL18基因的克隆与序列分析 | 第52-53
页 |
| · PRV Ea株UL25基因的克隆与序列分析 | 第53
页 |
| · PRV Ea株UL26基因的克隆与序列分析 | 第53-54
页 |
| · PRV Ea株UL26.5基因的克隆与序列分析 | 第54
页 |
| · PRV Ea株UL35基因的克隆与序列分析 | 第54-55
页 |
| · PRV Ea株UL38基因的克隆与序列分析 | 第55
页 |
| · PRV Ea株主要衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达与检测 | 第55-61
页 |
| · PRV Ea株主要衣壳蛋白原核表达质粒的构建 | 第55-57
页 |
| · PRV Ea株衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达与检测 | 第57-61
页 |
| · PRV Ea株衣壳蛋白在HeLa细胞中的表达与定位分析 | 第61-65
页 |
| · PRV Ea株衣壳蛋白真核表达质粒的构建 | 第61-64
页 |
| · PRV Ea株衣壳蛋白真核表达质粒在HeLa细胞中的表达 | 第64-65
页 |
| · 哺乳动物双杂交检测PRV Ea株衣壳蛋白的相互作用 | 第65-72
页 |
| · 哺乳动物双杂交表达质粒的构建 | 第65-71
页 |
| · 哺乳动物双杂交表达质粒转染细胞后双荧光检测 | 第71-72
页 |
| · GST Pull-Down验证衣壳蛋白UL19与UL26.5之间的相互作用 | 第72-75
页 |
| · 原核表达质粒pGEX-UL26.5的构建与鉴定 | 第72-73
页 |
| · UL26.5基因在大肠杆菌中的表达 | 第73
页 |
| · 转作质粒pFastBac HT-UL19与重组杆状病毒rBacmid-UL19的构建 | 第73-74
页 |
| · 重组杆状病毒rBacUL19表达产物的SDS-PAGE检测 | 第74
页 |
| · UL26.5与UL19相互作用的检测 | 第74-75
页 |
| · 免疫共沉淀验证衣壳蛋白之间的相互作用 | 第75-77
页 |
| · 哺乳动物表达质粒的构建 | 第75
页 |
| · 免疫共沉淀 | 第75-77
页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第77-80
页 |
| · 讨论 | 第77-79
页 |
| · PRV Ea株主要衣壳蛋白基因的克隆 | 第77-78
页 |
| · PRV Ea株衣壳蛋白基因的表达以及在HeLa细胞中的定位 | 第78
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| · 伪狂犬病毒衣壳的装配 | 第78
页 |
| · 哺乳动物双杂交体系的选择 | 第78-79
页 |
| · PRV Ea株衣壳蛋白的相互作用 | 第79
页 |
| · 结论 | 第79-80
页 |
| 参考文献 | 第80-87
页 |
| 致谢 | 第87
页 |
