定点突变探讨嗜热蛋白酶PhpI活性调控机制



定点突变探讨嗜热蛋白酶PhpI活性调控机制

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定点突变探讨嗜热蛋白酶PhpI活性调控机制

论文目录
内容提要	第1-8 页
第1章前言	第8-20 页
· 嗜热微生物	第8-11 页
· 嗜热微生物的定义和分类	第8-11 页
· 嗜热微生物的应用	第11 页
· 蛋白酶	第11-14 页
· 蛋白酶的定义和分类	第11-14 页
· 嗜热蛋白酶的应用	第14 页
· 蛋白酶Pyrococcus horikoshii Protease I（PhpI）	第14-18 页
· 超嗜热古菌Pyrococcus horikoshii OT3	第14-15 页
· DJ-1/ThiJ/pfpI超家族	第15-16 页
· 蛋白酶PhpI	第16-18 页
· 定点突变——酶分子的理性设计	第18 页
· 立题依据	第18-20 页
第2章材料与方法	第20-32 页
· 实验材料	第20-24 页
· 质粒与菌种	第20-21 页
· 主要实验试剂	第21-22 页
· 主要仪器	第22-23 页
· 培养基	第23-24 页
· 实验方法	第24-32 页
· 突变体的构建	第24-26 页
· 突变体基因的表达	第26-27 页
· 目的蛋白的提取、纯化与鉴定	第27-29 页
· 目的蛋白的定量	第29 页
· 蛋白酶活力的测定	第29-31 页
· 生物学软件	第31-32 页
第3章重组蛋白酶PhpI活性形式的确定及酶学性质表征	第32-39 页
· 引言	第32 页
· PhpI蛋白酶的纯化及活性形式的确定	第32-35 页
· PhpI蛋白酶催化活性的测定	第35-38 页
· 底物特异性的测定	第35-37 页
· 氨基肽酶与内切酶底物动力学常数的测定	第37-38 页
· 小结	第38-39 页
第4章活性中心120 位点对PhpI蛋白酶催化活性的影响	第39-47 页
· 引言	第39 页
· Tyr120 位点的确定	第39-41 页
· 120 位点突变体对催化反应动力学的影响	第41-42 页
· 底物分子对接	第42-45 页
· 小结	第45-47 页
第5章蛋白质别构部位残基对PhpI蛋白酶催化活性的影响	第47-54 页
· 引言	第47 页
· 别构部位突变位点的确定	第47-49 页
· 突变体动力学常数的测定	第49-52 页
· 小结	第52-54 页
参考文献	第54-58 页
致谢	第58-59 页
中文摘要	第59-61 页
Abstract	第61-63 页

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