论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 文中的缩略词 | 第10-14页 |
| 1 研究背景及意义 | 第14-26页 |
| 1.1 杆状病毒概论 | 第14-16页 |
| 1.1.1 杆状病毒的分类 | 第14页 |
| 1.1.2 杆状病毒的结构 | 第14-16页 |
| 1.1.3 杆状病毒的感染周期 | 第16页 |
| 1.1.4 杆状病毒的基因表达 | 第16页 |
| 1.2 杆状病毒的核心基因 | 第16-19页 |
| 1.3 杆状病毒的结构蛋白 | 第19-22页 |
| 1.3.1 核衣壳结构蛋白 | 第19-20页 |
| 1.3.2 囊膜蛋白 | 第20-22页 |
| 1.4 基因敲除与λ-Red同源重组技术 | 第22-25页 |
| 1.4.1 Bac-to-bac表达系统 | 第23-25页 |
| 1.5 本实验的研究内容及意义 | 第25-26页 |
| 2 实验材料及工具 | 第26-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-32页 |
| 2.1.1 菌株、细胞系 | 第26页 |
| 2.1.2 质粒 | 第26页 |
| 2.1.3 培养基及抗生素 | 第26-27页 |
| 2.1.4 常用的酶及分子量Maker | 第27-28页 |
| 2.1.5 常用试剂及试剂盒 | 第28页 |
| 2.1.6 常用溶液、缓冲液的配制方法 | 第28-30页 |
| 2.1.7 引物合成及测序 | 第30-31页 |
| 2.1.8 实验过程中所构建的重组质粒及重组病毒 | 第31-32页 |
| 2.2 主要仪器 | 第32-34页 |
| 3 实验方法与步骤 | 第34-50页 |
| 3.1 重组质粒的构建 | 第34-42页 |
| 3.1.1 重组质粒pKS-eup-cm-edp的构建 | 第34-40页 |
| 3.1.2 重组质粒pF-gfp-P_(p10)-P_(e18)e18-sv40-polh的构建 | 第40页 |
| 3.1.3 重组质粒pF-gfp-P_(p10)-P_(iel)-e18-sv40-polh的构建 | 第40-41页 |
| 3.1.4 重组质粒pF-P_(p10)-e18-sv40-polh的构建 | 第41-42页 |
| 3.2 Bacmid突变体的构建 | 第42-46页 |
| 3.2.1 敲除e18基因 | 第42-43页 |
| 3.2.2 敲除e18基因的Bacmid突变体的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.2.3 转座及重组Bacmid的筛选与鉴定 | 第44-46页 |
| 3.3 DNA对Sf9细胞的转染 | 第46-47页 |
| 3.4 病毒上清液的收取及TCID_(50)的测定 | 第47页 |
| 3.5 病毒液感染Sf9细胞 | 第47-48页 |
| 3.6 免疫荧光及共聚焦显微镜分析 | 第48-50页 |
| 3.6.1 免疫荧光 | 第48-49页 |
| 3.6.2 共聚焦显微镜照相 | 第49-50页 |
| 4 实验结果 | 第50-65页 |
| 4.1 e18(ac143)基因的敲除及回复突变体的构建 | 第50-53页 |
| 4.2 敲除e18对病毒增殖的影响 | 第53-56页 |
| 4.3 e18早表达对病毒增殖的影响 | 第56-61页 |
| 4.3.1 e18早表达突变体Bacmid的构建 | 第56-57页 |
| 4.3.2 两种不同的e18早表达突变体Bacmid对病毒增殖的影响 | 第57-61页 |
| 4.4 e18极晚期过量表达对病毒增殖的影响 | 第61-63页 |
| 4.4.1 e18极晚期过量表达突变体Bacmid的构建 | 第61-62页 |
| 4.4.2 e18极晚期过量表达突变体Bacmid对病毒增殖的影响 | 第62-63页 |
| 4.5 ODV-E18在宿主细胞中的亚细胞定位 | 第63-65页 |
| 5 讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
