论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-12页 |
| 1.1 转基因研究进展 | 第9页 |
| 1.2 转基因检测的研究 | 第9-10页 |
| 1.3 Pmi基因 | 第10-11页 |
| 1.4 CAMV 35S启动子研究进展 | 第11页 |
| 1.5 免疫印记（Western Blotting）技术及其应用 | 第11页 |
| 1.6 研究意义 | 第11-12页 |
| 2 材料与方法 | 第12-19页 |
| 2.1 实验材料 | 第12-13页 |
| 2.1.1 水稻材料 | 第12页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第12页 |
| 2.1.3 试剂和用品 | 第12页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第12-13页 |
| 2.2 水稻的种植与取材 | 第13页 |
| 2.2.1 水稻的种植 | 第13页 |
| 2.2.2 水稻的取材 | 第13页 |
| 2.3 Pmi基因的克隆 | 第13-15页 |
| 2.3.1 Pmi产物的扩增 | 第13-14页 |
| 2.3.2 Pmi产物的纯化 | 第14页 |
| 2.3.3 PCR产物及质粒载体的酶切 | 第14页 |
| 2.3.4 连接 | 第14页 |
| 2.3.5 转化 | 第14-15页 |
| 2.3.6 验证 | 第15页 |
| 2.4 Pmi基因的原核表达 | 第15-16页 |
| 2.4.1 PMI重组蛋白质的小量诱导表达 | 第15页 |
| 2.4.2 PMI重组蛋白质的大量诱导表达 | 第15-16页 |
| 2.4.3 PMI重组蛋白质的纯化 | 第16页 |
| 2.4.4 PMI重组蛋白质含量的测定 | 第16页 |
| 2.5 PMI蛋白质单克隆抗体的制备 | 第16页 |
| 2.6 水稻材料总蛋白质的提取 | 第16-17页 |
| 2.7 Western Blotting | 第17-18页 |
| 2.7.1 Western Blotting检测 | 第17页 |
| 2.7.2 WB分析和信号采集 | 第17-18页 |
| 2.8 转基因水稻中Pmi基因拷贝数的测定 | 第18-19页 |
| 2.8.1 转基因水稻基因组DNA的提取 | 第18页 |
| 2.8.2 转基因水稻外源基因Pmi的Real time-PCR检测 | 第18页 |
| 2.8.3 Real time-PCR数据分析 | 第18-19页 |
| 3 实验结果 | 第19-30页 |
| 3.1 Pmi基因的克隆 | 第19页 |
| 3.2 PMI蛋白质的表达、纯化及特异性抗体的制备 | 第19-20页 |
| 3.3 PMI蛋白质在水稻叶片组织中的含量分析 | 第20-21页 |
| 3.4 PMI蛋白质在水稻稻米中的检测 | 第21-22页 |
| 3.5 PMI蛋白质在转基因水稻中的表达特征 | 第22页 |
| 3.6 PMI蛋白质在不同时期叶片、根部表达丰度的比较 | 第22-23页 |
| 3.7 PMI蛋白质在T1 代转基因水稻种子中的检测 | 第23-24页 |
| 3.8 PMI蛋白质在T1 代转基因水稻叶片中的检测 | 第24-28页 |
| 3.9 PMI蛋白质在T2 代水稻种子中的检测 | 第28页 |
| 3.10 Pmi基因在转基因水稻中拷贝数的检测 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-37页 |
| 附录 | 第37-38页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第38-39页 |
| 作者简历 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
