论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| · 支原体研究热点概述 | 第13-20页 |
| · 细胞形态学和复制 | 第14页 |
| · 生态学和栖息地 | 第14-15页 |
| · 支原体的体外培养 | 第15页 |
| · 支原体细胞膜 | 第15-16页 |
| · 代谢途径和能量代谢 | 第16-17页 |
| · 基因组测序、最小细胞的概念及构建合成支原体 | 第17-19页 |
| · 致病机制 | 第19页 |
| · 支原体黏附 | 第19页 |
| · 抗原变异 | 第19-20页 |
| · 鸡毒支原体代谢相关酶类及基因研究工具的研究进展 | 第20-25页 |
| · 糖酵解酶及脂肪代谢相关酶 | 第20-22页 |
| · 支原体基因研究工具 | 第22-25页 |
| 第二章 供体菌R_(low)株的生物学特性 | 第25-32页 |
| · 材料和方法 | 第25-27页 |
| · 菌株 | 第25页 |
| · 支原体培养基的配制 | 第25页 |
| · 生长特性 | 第25-26页 |
| · 药敏试验 | 第26页 |
| · 免疫原性 | 第26页 |
| · 黏附性 | 第26-27页 |
| · 供体菌R_(low)毒株的16s rRNA 鉴定 | 第27页 |
| · 结果 | 第27-30页 |
| · R_(low)毒株的生长曲线 | 第27页 |
| · 固体培养周期及菌落形态 | 第27-28页 |
| · 电镜检测 | 第28页 |
| · 药敏试验 | 第28-29页 |
| · 玻片黏附 | 第29页 |
| · DF1 黏附 | 第29页 |
| · 16s rRNA 鉴定 | 第29-30页 |
| · 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 转座载体的改造及转座筛选 | 第32-41页 |
| · 材料与方法 | 第32-35页 |
| · 菌株及实验动物 | 第32页 |
| · 载体与主要试剂 | 第32页 |
| · 主要缓冲液及试剂配制 | 第32-33页 |
| · mini-Tn4001Gen~R 载体的构建 | 第33-34页 |
| · MG R_(low)毒株细菌浓度与庆大霉素的MIC 的关系 | 第34页 |
| · 转座载体电转化 | 第34页 |
| · 挑斑及筛选方法 | 第34-35页 |
| · 结果 | 第35-39页 |
| · mini-Tn4001Gen~R 载体的构建 | 第35-36页 |
| · 电转化筛选结果 | 第36-39页 |
| · 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 鸡毒支原体磷酸丙糖异构酶生物学功能研究 | 第41-53页 |
| · 材料和方法 | 第41-45页 |
| · 菌株及实验动物 | 第41页 |
| · 载体与主要试剂 | 第41页 |
| · 主要缓冲液及试剂配制 | 第41-42页 |
| · MG R_(low)株基因组提取 | 第42页 |
| · tpiA 的分子克隆和原核表达 | 第42-43页 |
| · 多抗制备及膜定位的Western-blot 分析 | 第43页 |
| · TpiA 的UV 交联 | 第43页 |
| · TpiA 的酶活检测 | 第43-44页 |
| · 鸡毒支原体细胞黏附试验和入侵试验 | 第44页 |
| · TpiA 定向缺失载体的构建 | 第44-45页 |
| · 结果 | 第45-52页 |
| · PCR 克隆及序列测定 | 第45-46页 |
| · 原核表达及可溶性分析 | 第46页 |
| · 蛋白纯化 | 第46-47页 |
| · 多抗制备及膜定位的初步鉴定 | 第47-48页 |
| · TpiA 的UV 交联反应 | 第48页 |
| · 重组鸡毒支原体rTpiA 的酶活检测 | 第48-49页 |
| · TpiA 抗体对MG 黏附的影响 | 第49页 |
| · TpiA 抗体对MG 入侵细胞的影响 | 第49-50页 |
| · TpiA 定向缺失载体的构建 | 第50-52页 |
| · 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 鸡毒支原体LicA 的表达及定位 | 第53-58页 |
| · 材料与方法 | 第53-55页 |
| · 菌株及实验动物 | 第53页 |
| · 载体与主要试剂 | 第53页 |
| · 实验室试剂配制 | 第53-54页 |
| · licA 的分子克隆及原核表达 | 第54-55页 |
| · 多抗制备及膜定位的Western-blot 分析 | 第55页 |
| · 结果 | 第55-57页 |
| · PCR 克隆及序列测定 | 第55页 |
| · 膜定位分析 | 第55页 |
| · 原核表达及纯化 | 第55-57页 |
| · Western-blot 检测LicA 的膜定位 | 第57页 |
| · 讨论 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65页 |
