论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| · 前言 | 第11页 |
| · PRRSV 基因组编码蛋白的分子生物学特性 | 第11-15页 |
| · 非结构蛋白 | 第11-12页 |
| · GP2 | 第12-13页 |
| · GP3 | 第13页 |
| · GP4 | 第13页 |
| · GP5 | 第13-14页 |
| · GP6 | 第14页 |
| · GP7 | 第14-15页 |
| · PRRSV 单克隆抗体的研究进展 | 第15-18页 |
| · 非结构蛋白的单抗 | 第15页 |
| · 次要结构蛋白的单抗 | 第15-16页 |
| · GP5 蛋白单抗 | 第16-17页 |
| · M 蛋白单抗 | 第17页 |
| · N 蛋白单抗 | 第17-18页 |
| · 本实验的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 PRRSV N 蛋白的原核表达、纯化及鉴定 | 第19-33页 |
| · 实验材料 | 第19-20页 |
| · 病毒、质粒，菌株及细胞 | 第19页 |
| · 酶和主要试剂 | 第19页 |
| · 实验主要试剂配制 | 第19-20页 |
| · 实验方法 | 第20-27页 |
| · NA-PRRSV ORF7 基因的获得 | 第20-21页 |
| · 原核表达载体 pET-30a(+)-NA-PRRSV ORF7 的构建 | 第21-24页 |
| · 美洲型 PRRSV GP7 在大肠杆菌中的诱导表达、蛋白纯化 | 第24-26页 |
| · 重组 NA GP7 蛋白抗原性鉴定 | 第26-27页 |
| · 结果 | 第27-31页 |
| · 序列分析 | 第27页 |
| · Marc-145 细胞培养 | 第27-28页 |
| · 美洲型 PRRSV ORF7 基因的扩增,T 载体连接及鉴定 | 第28-29页 |
| · 原核表达载体的构建及双酶切鉴定 | 第29页 |
| · 原核表达 N 蛋白的诱导表达及纯化 | 第29-31页 |
| · Western blottiing 及 ELISA 分析 NA GP7 蛋白的抗原性 | 第31页 |
| · 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 PRRSV N 蛋白单抗的制备及生物学特性分析 | 第33-49页 |
| · 实验材料 | 第33-34页 |
| · 毒株及实验动物 | 第33页 |
| · 实验试剂 | 第33页 |
| · 培养基配制 | 第33-34页 |
| · 实验方法 | 第34-43页 |
| · 动物免疫、筛选方法的建立以及小鼠效价的测定 | 第34-35页 |
| · 杂交瘤细胞株的制备 | 第35-37页 |
| · 杂交瘤细胞的扩大培养及冻存 | 第37-38页 |
| · 单克隆抗体的大量制备 | 第38页 |
| · 单克隆抗体的纯化 | 第38-39页 |
| · 纯化后腹水浓度和效价的测定 | 第39页 |
| · 单克隆抗体的鉴定 | 第39-40页 |
| · 单克隆抗体的稳定性鉴定 | 第40页 |
| · 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第40-41页 |
| · 单克隆抗体抗原表位鉴定 | 第41-43页 |
| · 结果 | 第43-47页 |
| · 间接 ELISA 方法的建立及小鼠多抗血清效价的检测 | 第43-44页 |
| · 杂交瘤细胞的制备和筛选 | 第44页 |
| · 腹水的纯化 | 第44-45页 |
| · McAb 亚型鉴定 | 第45页 |
| · 单克隆抗体稳定性的鉴定 | 第45页 |
| · 纯化后单克隆抗体的效价测定 | 第45-46页 |
| · 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第46页 |
| · 对单抗识别的抗原表位的初步分析 | 第46-47页 |
| · 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
