论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
abstract | 第8-10页 |
缩写及中英文对照 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1 经典模式生物—果蝇 | 第14-17页 |
1.1 果蝇简介 | 第14-16页 |
1.2 果蝇卵巢的基本结构 | 第16-17页 |
2 核纤层蛋白Lamin研究概况 | 第17-19页 |
3 调控果蝇卵巢生殖干细胞命运的信号通路 | 第19-24页 |
3.1 TGF-β/Dpp信号通路 | 第19-20页 |
3.2 JAK/STAT信号通路 | 第20-21页 |
3.3 Hedgehog信号通路 | 第21-23页 |
3.4 Notch信号通路 | 第23-24页 |
第二章 实验材料与方法 | 第24-45页 |
1 实验材料 | 第24-30页 |
1.1 果蝇品系 | 第24-25页 |
1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
1.3 实验试剂 | 第26-28页 |
1.4 引物与载体 | 第28-30页 |
2 实验方法 | 第30-45页 |
2.1 果蝇保种与饲养 | 第30页 |
2.2 果蝇免疫组织化学染色技术 | 第30-31页 |
2.3 果蝇卵巢基因组DNA提取 | 第31-32页 |
2.4 果蝇lamin转基因载体构建技术 | 第32-36页 |
2.5 转基因果蝇品系构建 | 第36-38页 |
2.6 FLP/FRT有丝分裂重组分析 | 第38-39页 |
2.7 果蝇卵巢总RNA提取与反转录技术 | 第39-40页 |
2.8 实时荧光定量PCR技术 | 第40-41页 |
2.9 果蝇卵巢总蛋白提取 | 第41页 |
2.10 蛋白免疫印迹技术 | 第41-44页 |
2.11 数据分析 | 第44-45页 |
第三章 实验结果与分析 | 第45-65页 |
3.1 果蝇不育系表型筛选 | 第45页 |
3.2 lamin基因调控果蝇卵巢生殖干细胞的维持 | 第45-51页 |
3.2.1 lamin基因突变导致果蝇卵巢生殖干细胞的丢失 | 第45-48页 |
3.2.2 lamin基因RNA干扰导致卵巢生殖干细胞的缺失 | 第48-49页 |
3.2.3 lamin基因内源性突变导致卵巢生殖干细胞的丢失 | 第49-51页 |
3.3 lamin转基因果蝇品系的构建 | 第51-53页 |
3.3.1 转基因载体的构建 | 第51-52页 |
3.3.2 质粒提取及转基因显微注射 | 第52页 |
3.3.3 转基因果蝇的鉴定 | 第52-53页 |
3.4 lamin基因缺失表型的挽救实验 | 第53-58页 |
3.5 荧光定量PCR检测卵巢lamin基因的表达 | 第58-59页 |
3.6 Lamin蛋白的表达检测 | 第59-60页 |
3.7 Lamin蛋白表达模式的检测 | 第60页 |
3.8 lamin与bam基因的遗传互作研究 | 第60-62页 |
3.9 lamin基因过表达分析 | 第62-63页 |
3.10 lamin突变卵巢的凋亡检测 | 第63-65页 |
第四章 讨论与展望 | 第65-68页 |
4.1 lamin基因调控果蝇卵巢生殖干细胞命运的内外源分析 | 第65-66页 |
4.2 lamin基因调控果蝇卵巢干细胞命运的机制探讨 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-78页 |
附录 | 第78-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
硕士期间发表论文及获奖情况 | 第84页 |