论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
1 引言 | 第10-30页 |
· 植原体研究进展 | 第11-14页 |
· 植原体的发现及其分类的起步 | 第11-12页 |
· 植原体病害的症状 | 第12-14页 |
· 苦楝丛枝病植原体病害的研究状况 | 第14页 |
· 植原体病原特性 | 第14-15页 |
· 植原体的基本形态和超微结构 | 第14页 |
· 植原体的生理特征 | 第14-15页 |
· 植原体的传播方式 | 第15页 |
· 植原体的检测和鉴定 | 第15-20页 |
· 血清学检测 | 第15-16页 |
· 核酸杂交检测 | 第16-17页 |
· PCR 检测 | 第17-19页 |
· RFLP 检测 | 第19-20页 |
· 植原体的分类 | 第20-24页 |
· 基于生物学特性的分类 | 第20-21页 |
· 基于血清学和DNA 分子杂交的分类 | 第21页 |
· 基于核糖体RNA(ribosomal RNA,rRNA)的RFLP 分类 | 第21-22页 |
· 基于核糖体RNA 序列及系统发育的分类 | 第22-24页 |
· 植原体的分子生物学 | 第24-26页 |
· 165 rRNA 基因序列 | 第25页 |
· 165-235 rRNA 基因之间的间隔区域(SR) | 第25页 |
· 核糖体蛋白质操纵子基因序列 | 第25-26页 |
· 延伸因子基因序列 | 第26页 |
· 植原体的系统发育研究 | 第26-28页 |
· 植原体基因组及其染色质外DNA | 第28-29页 |
· 研究目的及意义 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-37页 |
· 材料来源 | 第30页 |
· 方法 | 第30-37页 |
· 苦楝丛枝病植株总DNA 提取 | 第30页 |
· 苦楝丛枝病植原体165 rRNA 基因的PCR 扩增 | 第30-32页 |
· 引物设计与合成 | 第30-31页 |
· 直接PCR( Direct-PCR) | 第31页 |
· 巢式PCR( Nested-PCR ) | 第31-32页 |
· 苦楝丛枝病植原体的16SrRNA 基因扩增产物的RFLP 分析 | 第32-33页 |
· 苦楝丛枝病植原体酶切 | 第32页 |
· 扩增产物的聚丙烯酰胺电泳检测 | 第32-33页 |
· 苦楝丛枝病植原体核糖体蛋白( RIBOSOMAL PROTEIN,RP)基因的PCR 扩增 | 第33页 |
· 引物设计与合成 | 第33页 |
· PCR 扩增 | 第33页 |
· 苦楝丛枝病植原体165 rRNA 基因和核糖体蛋白(ribosomal protein,rp 基因序列的克隆及序列测定 | 第33-37页 |
· PCR 产物纯化 | 第33-34页 |
· 连接 | 第34页 |
· 感受态细胞制备 | 第34-35页 |
· 转化 | 第35页 |
· 重组质粒DNA 提取(采用碱裂解法提取少量质粒) | 第35-36页 |
· 重组质粒DNA 酶切鉴定 | 第36页 |
· 重组质粒DNA 的PCR 鉴定 | 第36页 |
· 序列测定 | 第36页 |
· 序列同源性比较 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-50页 |
· 感病植株的症状表现 | 第37页 |
· 苦楝丛枝病植原体165 RDNA PCR 扩增结果 | 第37-39页 |
· 苦楝丛枝病植原体165 RDNA PCR-RFLP 比较分析 | 第39页 |
· 苦楝丛枝病植原体核糖体蛋白基因(RP)片段的PCR 扩增结果 | 第39-40页 |
· 苦楝丛枝病植原体的克隆及重组质粒酶切鉴定结果 | 第40-43页 |
· 重组质粒提取及酶切结果 | 第40-42页 |
· 苦楝丛枝病植原体的重组质粒PCR 鉴定结果 | 第42-43页 |
· 苦楝丛枝病植原体的165 RRNA基因和核糖体蛋白基因序列测定及同源性比较结果 | 第43-50页 |
· 苦楝丛枝病植原体云南株系和贵州株系间的165 rRNA 基因比较结果 | 第43-45页 |
· 苦楝丛枝病植原体云南株系和贵州株系间的核糖体蛋白基因比较结果 | 第45-46页 |
· 苦楝丛枝病植原体云南株系和贵州株系与其他植原体株系的165 rRNA 基因序列分析及同源性比较结果 | 第46-47页 |
· 苦楝丛枝病植原体与其他植原体株系核糖体蛋白基因(rp)序列分析及同源性比较结果 | 第47-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
· 首次在云南省及贵州省报道了苦楝丛枝病 | 第50页 |
· 云南苦楝丛枝病和贵州苦楝丛枝病均为同一个植原体株系引起 | 第50页 |
· 苦楝丛枝病植原体云南株系和贵州株系的165 RRNA 和核糖体蛋白基因的差异 | 第50页 |
· 引起不同症状的苦楝植原体株系的分类差异 | 第50-51页 |
· 基于165R RNA 和核糖体蛋白基因对苦楝丛枝病植原体云南株系和贵州株系的分类 | 第51-52页 |
· 苦楝丛枝病植原体云南株系和贵州株系的复合侵染 | 第52-53页 |
5 结论与展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
附录A 常用的化学试剂量、分子生物试剂和仪器 | 第62-63页 |
附录B 常用试剂的配制 | 第63-66页 |
附录C 缩略词 | 第66-67页 |
致谢 | 第67
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