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桃树组蛋白H3.3基因（PpH3.3）的克隆及表达特性研究
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桃树组蛋白H3.3基因（PpH3.3）的克隆及表达特性研究
论文目录
 
中文摘要第10-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-29页
　　· 休眠概述第13-21页
　　　　· 休眠的定义第13-14页
　　　　· 休眠的界定第14页
　　　　· 休眠的分类第14页
　　　　· 休眠与细胞分裂第14-16页
　　　　· 类休眠第16-17页
　　　　· 内休眠第17-20页
　　　　　　· 生长停止：使内休眠建立第17-19页
　　　　　　· 内休眠的建立：使分生组织对促进生长的信号不敏感第19页
　　　　　　· 内休眠的保持第19-20页
　　　　　　· 内休眠的解除：能够生长第20页
　　　　· 生态休眠第20-21页
　　· 组蛋白第21-27页
　　　　· 组蛋白共价修饰第21-25页
　　　　　　· 组蛋白乙酰化修饰第21-23页
　　　　　　· 组蛋白的泛素化修饰第23-24页
　　　　　　· 组蛋白甲基化和去甲基化第24-25页
　　　　· 组蛋白变体第25-27页
　　　　　　· H3 变体 H3.3第25-26页
　　　　　　· H· 在基因组的特定位置富集第26-27页
　　· 休眠与表观遗传第27-28页
　　· 本研究的目的及意义第28-29页
2 实验材料与方法第29-48页
　　· 实验材料与处理第29-31页
　　　　· 植物材料第29页
　　　　· 实验处理第29页
　　　　· 菌株和载体第29页
　　　　· 生化试剂第29页
　　　　· 引物第29-31页
　　· 试验方法第31-48页
　　　　· RNA 提取第31页
　　　　　　· 改良 CTAB 法第31页
　　　　· 基因组 DNA 去除第31-32页
　　　　· cDNA 第一条链的合成第32-33页
　　　　· cDNA 全长序列的获得第33-38页
　　　　　　· PpH· 中间片段获得第33页
　　　　　　· PpH·′端序列的获得第33-34页
　　　　　　· PpH·′端序列的获得第34-37页
　　　　　　· cDNA 全长序列的获得第37-38页
　　　　· PpH· 全长基因组序列的获得第38-39页
　　　　　　· CTAB 法提取心叶烟基因组总 DNA第38页
　　　　　　· 总 DNA 提取产物的纯化第38-39页
　　　　　　· 基因组扩增反应第39页
　　　　· 启动子的分离第39-40页
　　　　· 电泳目的片段的回收第40-41页
　　　　· DNA 片段与克隆载体的连接第41页
　　　　· 大肠杆菌感受态细胞制备第41-42页
　　　　· 大肠杆菌感受态细胞的转化第42页
　　　　· 试剂盒质粒微量提取方案第42-43页
　　　　· 定量分析第43-44页
　　　　　　· 总 RNA 的提取第43页
　　　　　　· 反转录 cDNA 第一条链的合成第43-44页
　　　　· 植物表达载体的构建与转化第44-46页
　　　　　　· 杨树表达载体构建第44页
　　　　　　· 农杆菌 LBA4404 感受态制备第44页
　　　　　　· 冻融法转化农杆菌第44-45页
　　　　　　· 农杆菌介导转化杨树 84K第45-46页
　　　　· PpH· 启动子表达载体的构建第46-47页
　　　　　　· 杨树表达载体构建第46页
　　　　　　· 拟南芥的转化第46-47页
　　　　· GUS 组织化学染色第47-48页
3 结果与分析第48-61页
　　· PpH· 的分离第48-50页
　　　　· RNA 的提取及反转录第48页
　　　　· PpH·′片段的分离第48-49页
　　　　· PpH·′片段的分离第49页
　　　　· PpH· 全长 cDNA 的分离第49-50页
　　· PpH· 的序列分析第50-53页
　　　　· PpH· 的全长 cDNA 分析第50-51页
　　　　· PpH· 编码的蛋白质序列分析第51页
　　　　· PpH· 进化树分析第51-53页
　　· PpH· 基因组序列分析第53-54页
　　· PpH· 启动子序列分析第54-55页
　　· PpH· 基因的表达特性分析第55-57页
　　　　· 自然休眠进程中 PpH· 的表达变化第55-56页
　　　　· 高温和单氰胺对 PpH· 表达的影响第56-57页
　　· 转拟南芥表达载体的构建第57-58页
　　· GUS 染色第58页
　　· 转杨树 84K 正义表达载体的构建第58-59页
　　· 转基因再生植株的获得第59页
　　· 转基因植株的 PCR 鉴定第59-60页
　　· 下一步的计划第60-61页
讨论第61-63页
结论第63-64页
参考文献第64-83页
致谢第83-84页
攻读学位期间发表的学术论文第84 页

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