论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| abstract | 第5-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 果实成熟 | 第11页 |
| 1.2 NAC转录因子研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2.1 NAC转录因子结构域和分类 | 第12页 |
| 1.2.2 NAC转录因子的功能 | 第12-14页 |
| 1.3 类胡萝卜素代谢研究进展 | 第14-17页 |
| 1.3.1 类胡萝卜素的生物合成 | 第14-15页 |
| 1.3.2 番茄红素合成与代谢关键酶研究进展 | 第15-17页 |
| 1.4 果实成熟过程中的细胞壁代谢 | 第17-19页 |
| 1.4.1 多聚半乳糖醛酸酶(PG) | 第17页 |
| 1.4.2 果胶甲酯酶(PE) | 第17-18页 |
| 1.4.3 β-半乳糖苷酶(β-Gal) | 第18页 |
| 1.4.4 扩展蛋白(EXP) | 第18页 |
| 1.4.5 脂氧合酶(LOX) | 第18-19页 |
| 1.4.6 果胶裂解酶(PL) | 第19页 |
| 1.5 乙烯调控番茄果实成熟研究进展 | 第19-20页 |
| 1.6 脱落酸(ABA)调控果实成熟与软化 | 第20页 |
| 1.7 病毒诱导基因沉默技术 | 第20页 |
| 1.8 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 1.9 主要研究内容和技术路线 | 第21-22页 |
| 技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 VIGS技术沉默番茄SNACs基因 | 第23-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.5 实验器具灭酶处理 | 第25页 |
| 2.1.6 常用试剂及培养基的配制 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 侵染农杆菌液的准备 | 第26-27页 |
| 2.2.2 侵染番茄植株 | 第27页 |
| 2.2.3 果实总RNA的提取及检测 | 第27-29页 |
| 2.2.4 RNA的消化及cDNA第一条链的合成 | 第29-30页 |
| 2.2.5 引物的设计与合成 | 第30-31页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-39页 |
| 2.3.1 SNACs基因沉默番茄果实表型分析 | 第32-37页 |
| 2.3.2 目的基因片段的PCR扩增 | 第37页 |
| 2.3.3 番茄果实沉默基因表达水平检测 | 第37-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39页 |
| 2.5 本章小结 | 第39-41页 |
| 第3章 VIGS沉默SNACs番茄果实的成熟生理生化变化 | 第41-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 乙烯含量的测定 | 第42页 |
| 3.2.2 呼吸速率的测定 | 第42页 |
| 3.2.3 果实颜色的测定 | 第42-43页 |
| 3.2.4 果实硬度的测定 | 第43页 |
| 3.2.5 叶绿素和总类胡萝卜素含量测定 | 第43页 |
| 3.2.6 不同类胡萝卜素含量的测定 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-51页 |
| 3.3.1 沉默SNACs番茄果实呼吸速率的变化 | 第44-45页 |
| 3.3.2 沉默SNACs番茄果实乙烯释放量的变化 | 第45-46页 |
| 3.3.3 沉默SNACs番茄果实硬度的变化 | 第46-47页 |
| 3.3.4 沉默SNACs番茄果实色相角的变化 | 第47页 |
| 3.3.5 沉默SNACs番茄果实种子大小比较 | 第47-49页 |
| 3.3.6 沉默SNACs番茄果实叶绿素含量的变化 | 第49-50页 |
| 3.3.7 沉默SNACs番茄果实类胡萝卜素成分比较 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第4章 SNACs与番茄红素相关基因关系研究 | 第53-67页 |
| 4.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-64页 |
| 4.3.1 目的基因片段的PCR扩增 | 第54-55页 |
| 4.3.2 沉默SNAC4的番茄果实中的番茄红素相关基因表达量分析 | 第55-62页 |
| 4.3.3 沉默SNAC5的番茄果实中的番茄红素相关基因表达量分析 | 第62-63页 |
| 4.3.4 沉默SNAC6的番茄果实中的番茄红素相关基因表达量分析 | 第63页 |
| 4.3.5 沉默SNAC7的番茄果实中的番茄红素相关基因表达量分析 | 第63页 |
| 4.3.6 沉默SNAC9的番茄果实中的番茄红素相关基因表达量分析 | 第63-64页 |
| 4.3.7 沉默SNACs番茄果实中乙烯相关基因表达分析 | 第64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第5章 SNACs与番茄软化关系研究 | 第67-81页 |
| 5.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第67页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第67-68页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第68页 |
| 5.2 实验方法 | 第68-72页 |
| 5.2.1 基因定量表达分析 | 第68页 |
| 5.2.2 软化相关酶活测定 | 第68-72页 |
| 5.3 结果与分析 | 第72-79页 |
| 5.3.1 目的基因片段的PCR扩增 | 第72-73页 |
| 5.3.2 沉默SNACs的果实软化相关基因表达量分析 | 第73-76页 |
| 5.3.3 沉默SNACs的番茄果实的不同成熟时期软化相关酶活性分析 | 第76-79页 |
| 5.4 讨论 | 第79-80页 |
| 5.5 本章小结 | 第80-81页 |
| 第6章 乙烯和ABA与番茄SNAC4/9的关系研究 | 第81-89页 |
| 6.1 实验材料 | 第81-82页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第81页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第81页 |
| 6.1.3 主要仪器设备 | 第81-82页 |
| 6.2 实验方法 | 第82-83页 |
| 6.2.1 基因表达量测定 | 第82页 |
| 6.2.2 ABA测定方法 | 第82-83页 |
| 6.2.3 外源ABA和NDGA处理方法 | 第83页 |
| 6.2.4 乙烯利处理 | 第83页 |
| 6.3 结果与分析 | 第83-87页 |
| 6.3.1 沉默SNAC4/9对果实ABA含量及相关基因表达量的影响 | 第83-85页 |
| 6.3.2 乙烯利处理对果实色素积累的影响 | 第85-86页 |
| 6.3.3 ABA和NDGA处理对果实硬度的影响 | 第86-87页 |
| 6.4 讨论 | 第87页 |
| 6.5 本章小结 | 第87-89页 |
| 第7章 全文结论和展望 | 第89-91页 |
| 7.1 结论 | 第89-90页 |
| 7.2 展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 附录 | 第101-103页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第103-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
