论文目录 | |
| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文搞要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1.1 真核生物互斥可变剪接的研究进展 | 第12-22页 |
| 1.1.1 剪接 | 第12-14页 |
| 1.1.2 可变剪接 | 第14页 |
| 1.1.3 可变剪接的类型 | 第14-16页 |
| 1.1.4 可变剪接的意义 | 第16-17页 |
| 1.1.5 RNA二级结构与可变剪接 | 第17-19页 |
| 1.1.6 斥可变剪接的产生及调控机制 | 第19-22页 |
| 1.2 黑腹果蝇Dscam互斥可变剪接研究进展 | 第22-28页 |
| 1.2.1 黑腹果蝇Dscam基因 | 第22-23页 |
| 1.2.2 黑腹果蝇Dscam基因外显子簇6的互斥可变剪接调控模型 | 第23-26页 |
| 1.2.3 黑腹果蝇Dscam基因外显子簇4和9的互斥可变剪接模型 | 第26-27页 |
| 1.2.4 黑腹果蝇Dscam基因外显子簇17的互斥可变剪接模型 | 第27-28页 |
| 第二章 实验方案 | 第28-32页 |
| 2.1 研究目的及研究意义 | 第28-29页 |
| 2.1.1 研究目的 | 第28页 |
| 2.1.2 研究意义 | 第28-29页 |
| 2.2 研究内容 | 第29-30页 |
| 2.3 技术路线 | 第30页 |
| 2.4 载体结构图 | 第30-32页 |
| 第三章 材料与方法 | 第32-47页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第32-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-47页 |
| 3.2.1 黑腹果蝇及其他11种果蝇物种Dscam序列分析 | 第34页 |
| 3.2.2 果蝇物种Dscam外显子6.48和外显子7之间的序列二级结构预测 | 第34-35页 |
| 3.2.3 引物设计 | 第35-37页 |
| 3.2.4 黑腹果蝇成虫基因组提取 | 第37-38页 |
| 3.2.5 PCR扩增 | 第38-39页 |
| 3.2.6 PCR产物的割胶回收 | 第39-40页 |
| 3.2.7 PCR产物与T载体连接反应 | 第40页 |
| 3.2.8 E. coli TG1感受态细胞的制备(CPG法) | 第40-41页 |
| 3.2.9 连接产物转化感受态细胞 | 第41页 |
| 3.2.10 挑斑及菌液培养 | 第41页 |
| 3.2.11 质粒DNA提取 | 第41-42页 |
| 3.2.12 质粒DNA酶切鉴定 | 第42页 |
| 3.2.13 目的基因片段测序 | 第42页 |
| 3.2.14 minigene表达载体构建 | 第42-43页 |
| 3.3.15 重组表达载体浓度测定 | 第43页 |
| 3.2.16 minigene表达载体转染果蝇S2细胞 | 第43页 |
| 3.2.17 转染细胞总RNA提取 | 第43-44页 |
| 3.2.18 RNA逆转录反应 | 第44-45页 |
| 3.2.19 RT-PCR反应 | 第45-46页 |
| 3.2.20 RT-PCR产物酶切分析检测 | 第46页 |
| 3.2.21 净光密度分析 | 第46-47页 |
| 第四章 实验结果分析与讨论 | 第47-65页 |
| 4.1 果蝇Dscam基因可变外显子6.48后两个内含子元件具有物种特异性 | 第47-50页 |
| 4.2 minigene表达载体与各突变载体构建 | 第50-64页 |
| 4.2.1 minigene表达载体构建 | 第50-51页 |
| 4.2.2 突变载体构建 | 第51-53页 |
| 4.2.3 黑腹果蝇Dscam外显子6.48后的二级结构调控Dscam外显子6可变剪接的研究结果 | 第53-64页 |
| 4.3 讨论 | 第64-65页 |
| 研究创新点及展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |
