论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 英文缩略表 | 第8-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-20页 |
| · H1N1 及 H5N1 亚型流感病毒概述 | 第9-12页 |
| · H1N1 及 H5N1 亚型流感病毒的流行 | 第9-11页 |
| · 猪流感和禽流感的公共卫生意义 | 第11-12页 |
| · 抗体的研究进展 | 第12-20页 |
| · 抗体的结构及生物学特性 | 第13页 |
| · 抗体的发展历程 | 第13-17页 |
| · 单链抗体研究进展 | 第17-20页 |
| 第2章 抗 H1N1 和 H5N1 流感病毒单克隆抗体的制备 | 第20-36页 |
| · 材料和方法 | 第20-29页 |
| · 主要仪器 | 第20页 |
| · 实验动物 | 第20页 |
| · 主要试剂 | 第20-21页 |
| · DNA 疫苗的制备 | 第21-23页 |
| · 纯化 H1N1 和 H5N1 全病毒抗原的制备 | 第23-24页 |
| · BALB/C 小鼠的免疫程序 | 第24-25页 |
| · 检测方法的建立 | 第25页 |
| · 杂交瘤细胞系的建立 | 第25-27页 |
| · 单克隆抗体的鉴定 | 第27-28页 |
| · 单克隆抗体生物学特性研究 | 第28-29页 |
| · 结果 | 第29-33页 |
| · RNA 的提取及 HA 基因 RT-PCR 扩增 | 第29页 |
| · HA 基因表达质粒 PVAX1-HA 酶切鉴定 | 第29-30页 |
| · 杂交瘤细胞的制备 | 第30页 |
| · 单抗对流感病毒的中和活性 | 第30-31页 |
| · 间接免疫荧光检测单抗的结合特异性 | 第31-32页 |
| · 单克隆抗体稳定性鉴定 | 第32页 |
| · 单克隆抗体与不同流感病毒反应性分析 | 第32-33页 |
| · 讨论 | 第33-36页 |
| 第3章 单链抗体基因的克隆以及重组载体的构建 | 第36-44页 |
| · 材料和方法 | 第36-40页 |
| · 主要仪器 | 第36页 |
| · 主要试剂 | 第36页 |
| · 鼠单抗轻链和重链可变区基因的克隆 | 第36-37页 |
| · SCFV 基因构建 | 第37-39页 |
| · PCDNA-SCFV 重组质粒构建 | 第39-40页 |
| · 结果 | 第40-43页 |
| · VH 和 VL 基因的 PCR 扩增 | 第40-41页 |
| · VH 和 VL 基因序列分析 | 第41页 |
| · SCFV 基因构建 | 第41-42页 |
| · PCDNA-SCFV 重组质粒的酶切鉴定 | 第42页 |
| · 单链抗体在 MDCK 细胞中的转录表达 | 第42-43页 |
| · 讨论 | 第43-44页 |
| 第4章 靶向 H5N1、H1N1 流感病毒单链抗体抗病毒活性研究 | 第44-52页 |
| · 材料和方法 | 第44-46页 |
| · 病毒株、质粒和细胞 | 第44页 |
| · 主要仪器 | 第44页 |
| · 主要试剂 | 第44页 |
| · 引物设计 | 第44-45页 |
| · 细胞转染 | 第45页 |
| · 病毒半数细胞培养感染量（TCID50）的测定 | 第45页 |
| · REAL-TIME PCR 检测流感病毒 PB2 基因的拷贝数 | 第45-46页 |
| · 高内涵成像系统检测被流感病毒感染的 MDCK 细胞占总细胞的比例 | 第46页 |
| · 结果 | 第46-50页 |
| · Realtime-PCR 标准曲线的建立 | 第46-48页 |
| · 病毒 TCID50测定结果 | 第48页 |
| · Real-time PCR 检测流感病毒 PB2 片段拷贝数结果 | 第48-49页 |
| · 高内涵成像系统检测被流感病毒感染的 MDCK 细胞占总细胞的比例 | 第49-50页 |
| · 讨论： | 第50-52页 |
| 第5章 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
