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匍枝根霉碳代谢调控基因(cre)对纤维素酶表达调控作用的研究
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匍枝根霉碳代谢调控基因(cre)对纤维素酶表达调控作用的研究
论文目录
 
摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第1章 绪论第14-25页
　　· 选题意义第15-16页
　　· 研究现状第16-23页
　　　　· 纤维素简介第16-17页
　　　　· 纤维素酶的简介第17-20页
　　　　· 纤维素酶转录因子的研究进展第20-22页
　　　　· 真菌的转化第22-23页
　　· 研究目的及内容第23-25页
　　　　· 研究目的第23-24页
　　　　· 研究内容第24-25页
第2章 碳代谢阻遏基因cre的克隆及抗性基因的克隆第25-36页
　　· 实验材料第25-27页
　　　　· 菌株及载体第25页
　　　　· 培养基第25-26页
　　　　· 主要试剂及仪器第26-27页
　　· 实验方法第27-30页
　　　　· 菌株的培养及菌丝体预处理第27页
　　　　· 匍枝根霉基因组DNA提取第27-28页
　　　　· 目的片段的扩增第28页
　　　　· 大肠杆菌DH5α感受态制备第28页
　　　　· 目的基因与pUCm-T载体的连接和转化第28-29页
　　　　· 阳性克隆子的筛选、验证和测序第29页
　　　　· 单酶切验证第29-30页
　　　　· 匍枝根霉孢子对潮霉素B抗菌浓度的确定第30页
　　　　· pRS303H质粒提取第30页
　　　　· 潮霉素B抗性基因的克隆第30页
　　· 结果与讨论第30-35页
　　　　· 匍枝根霉DNA的提取第30-31页
　　　　· 目的条带及测序分析第31-32页
　　　　· 重组质粒电泳图第32-33页
　　　　· PCR及单酶切验证结果第33页
　　　　· 匍枝根霉菌丝体对潮霉素B抗菌浓度的确定第33-35页
　　· 小结第35-36页
第3章 构建融合基因转化匍枝根霉菌株第36-50页
　　· 实验材料第37-38页
　　　　· 菌种第37页
　　　　· 培养基第37-38页
　　　　· 试剂与仪器第38页
　　· 实验方法第38-43页
　　　　· 碳代谢阻遏基因cre和抗性基因的生物信息学分析第38页
　　　　· 重叠PCR构建cre-HygB基因第38-39页
　　　　· cre上游片段、下游片段同源臂的纯化与测序第39页
　　　　· 抗性基因的获取及纯化第39-40页
　　　　· 融合cre同源臂和抗性筛选标记第40页
　　　　· 重组质粒的构建第40页
　　　　· 孢子电转化第40-41页
　　　　· 转化子的验证第41页
　　　　· 匍枝根霉转化子PCR验证第41页
　　　　· 匍枝根霉转化子的RT-PCR验证第41-43页
　　· 结果与讨论第43-49页
　　　　· cre基因同源臂片段的获得第43页
　　　　· pRS303H质粒的提取及抗性基因的克隆第43-44页
　　　　· 构建cre-HygB基因及电泳图第44页
　　　　· cre-HygB基因连接T载体构建重组质粒第44-46页
　　　　· 孢子电转化第46-47页
　　　　· 匍枝根霉转化子的PCR验证第47页
　　　　· 匍枝根霉转化子的RT-PCR验证第47-49页
　　· 小结第49-50页
第4章 匍枝根霉突变株ΔCRE和TP-02发酵产酶实验第50-63页
　　· 材料与方法第51-55页
　　　　· 试剂第51页
　　　　· 仪器第51页
　　　　· 菌种第51-52页
　　　　· 培养基第52页
　　　　· 测定方法第52-53页
　　　　· 酶活测定第53-55页
　　　　· 单一碳源发酵实验第55页
　　　　· 淀粉水解液发酵实验第55页
　　· 结果与讨论第55-61页
　　　　· 葡萄糖标准曲线的绘制第55-56页
　　　　· 单一碳源发酵结果分析第56-59页
　　　　· 淀粉水解液发酵实验结果分析第59-61页
　　· 小结第61-63页
第5章 结论与展望第63-65页
　　结论第63-64页
　　展望第64-65页
参考文献第65-76页
攻读学位期间发表的学术论文目录第76-77页
致谢第77页

本篇论文共77页，点击这进入下载页面。
 
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