大肠杆菌碱性磷酸酶（EAP）-链亲和素（SA）融合蛋白的构建与表达



大肠杆菌碱性磷酸酶（EAP）-链亲和素（SA）融合蛋白的构建与表达

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大肠杆菌碱性磷酸酶（EAP）-链亲和素（SA）融合蛋白的构建与表达

论文目录
致谢	第1-5页
摘要	第5-6页
Abstract	第6-8页
目次	第8-11页
第一章绪论	第11-25页
· 酶标记物概述	第11页
· 标记酶应用	第11-14页
· 辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase)	第12页
· 荧光素酶(luciferase)	第12-13页
· 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AP)	第13-14页
· 研究现状	第14-23页
· 碱性磷酸酶研究状况	第15-19页
· 链亲和素研究状况	第19-23页
· 本研究内容及意义	第23-25页
· 研究目的及意义	第23-24页
· 本研究内容	第24页
· 本研究技术路线	第24-25页
第二章.碱性磷酸酶的表达与鉴定	第25-44页
· 实验材料	第25-29页
· 菌种与质粒	第25页
· 实验试剂	第25-26页
· 培养基与溶液	第26-28页
· 实验仪器	第28-29页
· 实验方法	第29-38页
· 目的基因获得以及克隆载体构建	第29-33页
· 目的基因定点突变与克隆载体	第33-36页
· 重组表达载体和表达菌株构建	第36-37页
· 重组蛋白的诱导表达	第37-38页
· 表达产物SDS-PAGE电泳分析	第38页
· 重组碱性磷酸酶酶活鉴定	第38页
· 结果与分析	第38-43页
· 目的基因两端添加酶切序列	第38-39页
· 目的基因连接克隆质粒鉴定	第39-40页
· 目的基因连接表达质粒以及表达鉴定	第40-43页
· 重组碱性磷酸酶酶活鉴定	第43页
· 小结	第43-44页
第三章链亲和素表达与鉴定	第44-60页
· 实验材料	第44-46页
· 菌种与质粒	第44页
· 实验试剂	第44页
· 实验培养基与溶液	第44-46页
· 实验仪器	第46页
· 实验方法	第46-50页
· 目的基因获得与合成	第46-47页
· 重组载体的构建	第47页
· 重组链亲和素表达菌株诱导表达	第47页
· 重组链亲和素表达蛋白纯化	第47-50页
· 链亲和素活性测定	第50页
· 实验结果与分析	第50-59页
· 链亲和素表达菌株构建	第50-52页
· 重组蛋白表达及纯化	第52-54页
· 重组蛋白酶活鉴定	第54-59页
· 小结	第59-60页
第四章融合蛋白的表达与鉴定	第60-71页
· 实验材料	第60-61页
· 质粒与菌株	第60页
· 主要实验试剂	第60页
· 实验所需溶液	第60页
· 实验仪器	第60-61页
· 实验方法	第61-64页
· pET24a-EAP-SA表达体系构建	第61-62页
· pET24a-SA-EAP表达体系构建	第62-63页
· 融合蛋白表达	第63页
· 融合蛋白复性	第63-64页
· 融合蛋白酶活测定	第64页
· 实验结果	第64-70页
· pET24a-SA-EAP克隆质粒鉴定	第64-65页
· 重组表达质粒鉴定	第65-67页
· 蛋白表达鉴定	第67-69页
· 酶活鉴定	第69-70页
· 讨论与分析	第70-71页
第五章结论与展望	第71-73页
· 结论	第71页
· 论文的创新与意义	第71-72页
· 展望	第72-73页
参考文献	第73-82页
作者简历及所取得的科研成果	第82页

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