双荧光T-RFLP方法的建立及应用
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双荧光T-RFLP方法的建立及应用
论文目录
摘要
第1-6页
ABSTRACT
第6-11页
引言
第11-12页
第1章 绪论
第12-25页
· 环境质量的生物评价指标
第13-14页
· 微生物群落多样性研究方法
第14-20页
· 传统研究方法
第15页
· 分子生物学研究方法
第15-20页
· T-RFLP技术
第20-24页
· T-RFLP技术在微生物群落研究中的应用
第20-22页
· 双荧光T-RFLP方法
第22-24页
· 本课题研究的目的和意义
第24-25页
第2章 实验材料与方法
第25-44页
· 实验材料
第25-26页
· 底泥样品材料的采集
第25-26页
· 实验药品试剂
第26-28页
· 实验试剂的配制
第26-28页
· 实验工具酶
第28页
· 实验仪器设备
第28-29页
· 实验方法
第29-44页
· 技术路线
第29-30页
· 细菌菌种的筛选
第30页
· 细菌菌种的活化及扩大培养
第30-31页
· 细菌基因组DNA的提取
第31-32页
· PCR反应及产物回收
第32-33页
· 连接与转化
第33-34页
· 细菌质粒的提取
第34页
· 重组质粒的验证
第34-36页
· 质粒配比的混合体系
第36-37页
· 底泥样品宏基因组的提取
第37-38页
· 电泳检测及核酸浓度测定
第38-39页
· 荧光PCR扩增反应
第39-40页
· 限制性内切酶酶切反应
第40页
· 酶切反应产物的脱盐处理
第40-41页
· 毛细管电泳检测
第41-42页
· 数据处理与分析
第42-44页
第3章 双荧光标记T-RFLP方法的建立
第44-61页
· 双荧光标记T-RFLP准确性验证实验
第44-49页
· 细菌菌种的筛选
第44-45页
· 细菌基因组DNA的提取
第45页
· PCR扩增反应
第45-46页
· 目的产物回收
第46页
· 提取质粒及测序
第46-47页
· 质粒的三类验证实验
第47-48页
· 质粒测序结果分析
第48-49页
· 质粒浓度测定
第49页
· 双荧光标记T-RFLP灵敏度检验实验
第49-61页
· 不同细菌质粒按体系配比
第49-50页
· 荧光引物PCR反应
第50-51页
· 限制性酶切反应及产物处理
第51页
· 毛细管电泳
第51-52页
· 双荧光T-RFLP图谱分析
第52-61页
第4章 大凌河底泥样品的双荧光T-RFLP实验
第61-76页
· 底泥样品实验结果
第61-64页
· 底泥样品宏基因组的提取
第61-62页
· PCR反应
第62-63页
· 毛细管电泳
第63-64页
· 实验结果分析
第64-76页
· 双荧光标记T-RFs种类和数量统计
第64-66页
· T-RFs图谱分析
第66-67页
· RDP数据库比对分析
第67-69页
· 样点间相似度分析
第69-70页
· 样点间菌群多样性分析
第70-73页
· 不同理化参数对细菌多样性影响的主成分分析
第73-76页
第5章 结论与展望
第76-78页
· 结论
第76页
· 展望
第76-78页
参考文献
第78-83页
附录 测序序列
第83-85页
致谢
第85页
本篇论文共
85
页,
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。
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