论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-25页 |
| 1.活性氧(ROS)的产生及其生物学效应 | 第10-15页 |
| 1.1 活性氧(ROS)的产生 | 第10页 |
| 1.2 活性氧(ROS)导致生物大分子氧化性损伤 | 第10-11页 |
| 1.3 活性氧(ROS)作为信号分子参与调控细胞生命活动 | 第11-15页 |
| 2.DNA氧化损伤及其修复机制 | 第15-19页 |
| 2.1 ROS氧化损伤DNA并产生大量8-羟鸟嘌呤(8-oxoG) | 第15-17页 |
| 2.2 特异性识别8-oxoG的酶及DNA修复系统 | 第17-19页 |
| 3.8-oxoG可能是一种细胞感受ROS信号调控基因表达的机制 | 第19-24页 |
| 3.1 8-oxoG可能是DNA的一种表观遗传学修饰促进炎症相关基因的表达 | 第19-20页 |
| 3.2 高氧环境下,OGG1 与含有8-oxoG的启动子的结合促进了NF-κB的募集和转录 | 第20-21页 |
| 3.3 OGG1可能参与NF-κB的翻译后修饰从而调控其转录活性 | 第21-24页 |
| 4.研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-35页 |
| 1.实验材料 | 第25-26页 |
| 1.1 细胞、菌株、质粒、抗体、干涉序列及主要试剂 | 第25-26页 |
| 1.2 主要实验器材 | 第26页 |
| 2.实验方法 | 第26-35页 |
| 2.1 细胞培养 | 第26-28页 |
| 2.2 OGG1 siRNA,MSK1 siRNA,Pim-1 siRNA干涉实验 | 第28页 |
| 2.3 Flag标签质粒转染实验 | 第28-29页 |
| 2.4 免疫荧光 | 第29-30页 |
| 2.5 RNA提取(Trizol法提取) | 第30页 |
| 2.6 反式聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第30-31页 |
| 2.7 常规PCR检测 | 第31-32页 |
| 2.8 核质分离(Chromatin Fractionation) | 第32页 |
| 2.9 核组分免疫沉淀(IP) | 第32-33页 |
| 2.10 蛋白质的提取和制备 | 第33页 |
| 2.11 蛋白质印迹法(Western Blot) | 第33-35页 |
| 第三章 结果 | 第35-46页 |
| 1.TNF-α诱导人肾上皮细胞(HEK293)Cxcl1/2,TNF-α基因的转录 | 第35-37页 |
| 2.TNF-α诱导ROS敏感的NF-κB信号通路的发生 | 第37-40页 |
| 2.1 TNF-α刺激引发NF-κB入核 | 第37-38页 |
| 2.2 TNF-α刺激引发RelA/p65 Ser276发生磷酸化 | 第38-39页 |
| 2.3 TNF-α刺激诱导的RelA/p65的应激入核不依赖于RelA/p65 S276磷酸化 | 第39-40页 |
| 3.OGG1 参与调控TNF-α诱导ROS敏感的NF-κB信号通路 | 第40-44页 |
| 3.1 OGG1不影响TNF-α刺激引发的RelA/p65入核过程 | 第40-41页 |
| 3.2 OGG1参与调控TNF-α刺激引发的RelA/p65 Ser276的磷酸化过程 | 第41-44页 |
| 4.OGG1 通过与MSK1 相互作用,参与调控TNF-α诱导ROS敏感的NF-κB RelA/p65 Ser276的磷酸化过程 | 第44-46页 |
| 4.1 TNF-α诱导ROS敏感的NF-κB途径中,MSK1,Pim1激酶磷酸化Rel A/p65 Ser276位点 | 第44-45页 |
| 4.2 OGG1与MSK1相互作用,间接参与调控RelA/p65 Ser276的磷酸化过程 | 第45-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-48页 |
| 1.TNF-α诱导ROS敏感的 NF-κB依赖的 Cxcl1/2,TNF-α基因的表达 | 第46-47页 |
| 2.OGG1参与调控TNF-α诱导ROS敏感的NF-κB信号通路,但蛋白质分子之间具体的相互作用机制尚不明确 | 第47-48页 |
| 第五章 结论和主要创新点 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
