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大腹圆蛛基因组DNA文库构建及其拖丝蛋白基因的杂交筛选
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大腹圆蛛基因组DNA文库构建及其拖丝蛋白基因的杂交筛选
论文目录
 
摘要第1-7 页
ABSTRACT第7-11 页
第1章 绪论第11-23 页
　　· 引言第11-12 页
　　· 蜘蛛丝的种类及其本质第12-15 页
　　· 蜘蛛拖丝蛋白的结构及其优良品质第15-18 页
　　· 蜘蛛拖丝蛋白的编码基因及其氨基酸序列特点第18 页
　　· 蜘蛛丝蛋白的克隆表达第18-20 页
　　· 蜘蛛丝蛋白的溶解和纺丝第20-21 页
　　· 蜘蛛丝的应用前景第21 页
　　· 课题研究的内容、目的和意义第21-23 页
第2章 实验材料和设计方案第23-29 页
　　· 实验材料和仪器第23-28 页
　　　　· 蜘蛛、菌株和质粒载体第23 页
　　　　· 酶与试剂第23-25 页
　　　　· 主要仪器设备第25-26 页
　　　　· 培养基和常用试剂的配制第26-28 页
　　· 实验流程第28-29 页
第3章 蜘蛛基因组DNA的提取第29-33 页
　　· 蜘蛛的解剖第29 页
　　· 蜘蛛基因组DNA的提取第29-32 页
　　　　· 尿素裂解法第29-30 页
　　　　· CTAB裂解法第30-31 页
　　　　· 改进的基因组DNA提取试剂盒法第31-32 页
　　· 品质鉴定第32-33 页
　　　　· 电泳第32 页
　　　　· 样本DNA纯度及含量的鉴定第32-33 页
第4章 蜘蛛基因组DNA的文库构建第33-38 页
　　· 准备第33 页
　　· 剪切基因组DNA第33-34 页
　　· 剪切DNA的末端补齐第34 页
　　· 筛选末端补平的40 kb DNA片段第34-35 页
　　· 回收40 kb DNA第35-36 页
　　· 连接第36 页
　　· 包装the CopyControl Fosmid Clones第36-37 页
　　· 测定CopyControl Fosmid Clones的包装滴定度第37-38 页
第5章 菌落原位杂交第38-45 页
　　· 涂板与转膜第38-39 页
　　　　· 大量细菌克隆的原位杂交筛选第38-39 页
　　　　· 少量阳性克隆的进一步原位杂交筛选第39 页
　　· 菌落的裂解和DNA与尼龙膜的结合第39-40 页
　　· 寡核苷酸探针的放射性同位素标记和纯化第40-42 页
　　　　· 用Exonuclease-free Klenow Fragment标记寡核苷酸探针第40-41 页
　　　　· 用乙醇沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸探针第41-42 页
　　· 杂交、洗膜与检测第42-45 页
　　　　· 滤膜的预洗脱和预杂交第42-43 页
　　　　· 杂交与洗膜第43-44 页
　　　　· 杂交信号的分析和阳性克隆的鉴定第44-45 页
第6章 质粒提取和测序第45-48 页
　　· 活化单克隆、保留菌种第45 页
　　· 诱导Fosmid阳性单克隆获得高拷贝第45-46 页
　　· 质粒提取第46 页
　　· 电泳第46-47 页
　　· 酶切分析第47 页
　　· 测序第47-48 页
第7章 结果与分析第48-66 页
　　· 蜘蛛基因组DNA的提取第48-51 页
　　　　· 三种提取方法的比较第48-50 页
　　　　· 尿素裂解法提取蜘蛛基因组DNA的原理第50-51 页
　　　　· 尿素裂解法提取蜘蛛基因组DNA的特点第51 页
　　· 蜘蛛基因组DNA Fosmid文库构建第51-54 页
　　　　· 大腹圆蛛基因组大小的确定第52 页
　　　　· 计算所建文库应该出现的克隆数第52-53 页
　　　　· 基因组DNA Fosmid文库的包装滴定度第53 页
　　　　· 涂板量第53-54 页
　　· 杂交筛选第54-57 页
　　　　· 杂交引物的设计与标记原理第54-55 页
　　　　· 杂交温度和洗膜温度第55-56 页
　　　　· 探针浓度第56 页
　　　　· 杂交结果第56-57 页
　　· 质粒提取、酶切鉴定和测序第57-66 页
　　　　· 诱导阳性单克隆获得高拷贝第57-58 页
　　　　· 质粒提取第58-59 页
　　　　· 酶切分析第59-61 页
　　　　· 测序第61-66 页
第8章 结论第66-68 页
　　· 结论第66-67 页
　　· 创新点第67 页
　　· 展望第67-68 页
参考文献第68-73 页
硕士期间发表论文和参加科研情况说明第73-74 页
致谢第74 页

本篇论文共74页，点击这进入下载页面。
 
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