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N乙酰半胱氨酸对镉致人胚肾细胞凋亡拮抗作用药学 |
[生化制药论文]
【摘要】 目的 探讨N乙酰半胱氨酸(Nacetyl cysteine,NAC)对氯化镉所致人胚肾(human embryonic kidney,HEK)细胞凋亡的拮抗作用。 方法 应用 四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测不同CdCl2浓度(0,10,20,40,80μmol/L)处理以及不同浓度NAC(1,2,4,8mmol/L)和镉联合作用对HEK细胞相对存活率和凋亡率的 影响 。结果 单纯染镉时,与对照组(0μmol/L)比较,20,40,80μmol/L CdCl23组HEK细胞相对存活率明显降低(P<0.01),HEK细胞凋亡率明显升高(P<0.01);NAC与镉联合作用时,与40μmol/L CdCl2比较,40μmol/L CdCl2+4,8mmol/L NAC2组HEK细胞相对存活率明显提高,40μmol/L CdCl2+2,4,8mmol/L NAC3组HEK细胞凋亡率明显降低。结论 一定浓度氯化镉可引起HEK细胞凋亡增加,NAC可以拮氯化镉引起的细胞凋亡。
【关键词】 镉
镉(Cadmium,Cd)在环境中不能降解,最终通过食物链转移到人体,其生物半减期长达10~30年,故在机体中长期蓄积而造成毒作用〔1〕。镉中毒所致机体损伤机制十分复杂且尚不明确。镉可通过细胞内钙超载、基因表达异常与氧化应激等多种途径引起细胞凋亡。其致细胞凋亡的机制与过程不完全相同,有 研究 显示〔2,3〕,镉致肝、肾细胞损伤与细胞凋亡关系密切。N乙酰半胱氨酸(NAC)作为一种巯基供给体,主要是一种抗氧化剂,具有抗细胞凋亡作用。本实验研究不同浓度的镉对人胚肾细胞存活力、凋亡率的影响以及NAC对染镉人胚肾细胞凋亡的影响,为镉中毒的发病机制和防治研究提供依据。
1 材料与方法
11 主要化学试剂 氯化镉(CdCl2 2.5H2O),优级纯;DMEM培养液;四甲基偶氮噻唑蓝(MTT);碘化丙啶(PI);胎牛血清;胰蛋白酶。
12 主要仪器 BB15型CO2恒温培养箱(德国Heraeus公司);BDFACScan流式细胞仪,SUNRISE酶标仪(瑞典Tecar公司)。
13 人胚……
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投稿人:7uy |
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最后编辑:fibg |
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