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酪氨信号放大间接免疫荧光组织化学方法

[中医学论文]                                 作者：鲍岚　焦西英　程希平　张旭

【关键词】  荧光抗体技术
　　关键词: 荧光抗体技术;激光;显微镜检查
　　0 引言
　　免疫组织化学方法是对细胞及细胞内的某种抗原物质进行定性、定位或定量检测的方法.随着标记技术的不断改进，使得免疫组织化学方法检测的敏感性大大增强;随着显微镜技术的发展，且与计算机技术的不断结合，可以对抗原物质作更加精确和全面的定位.我们应用酪氨信号放大间接免疫荧光组织化学方法，并结合激光共聚焦显微镜术对脑动脉Y1 受体免疫反应物质分布进行了观察.

　　1 材料和方法

　　1.1 酪氨信号放大间接免疫荧光组织化学方法  11只SD大鼠（200～250g），戊巴比妥钠（50mg・kg-1 ，ip）麻醉，经心脏灌注37℃生理盐水50mL和37℃的40g・L-1 多聚甲醛和2g・L-1 苦味酸磷酸缓冲固定液50mL，再灌注4℃同样固定液250mL，取大鼠全脑，在同样固定液中后固定1.5h，200g・L-1 蔗糖浸泡24h以上.4只大鼠分离其脑底部表面脑动脉，尽可能分离到最细的分支，有大脑前动脉、大脑前内动脉、大脑中动脉、颈内动脉、大脑后动脉、小脑上动脉、基底动脉和椎动脉及其分支;从其他3只大鼠片下脑底部的表层脑组织，其中含有完整的脑表面血管网.
    根据酪氨信号放大间接免疫荧光组织化学方法，对大鼠剥离的脑底部表面分离的脑动脉和片下的有脑表面血管网的表层脑组织进行组织处理.第一抗体为针对Y1 受体C末端肽片段（氨基酸序列为355～382）的纯化兔抗……

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投稿人：fd4rtf

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