【关键词】  ,丛生丝孢酵母菌

    【关键词】 丛生丝孢酵母菌；生物学鉴定

　　1实验资料

　　200309从我院1例无痛性血尿患者尿液中分离出一种酵母样菌，经鉴定确认为丛生丝孢酵母菌（Trichosporon pullulans, T.pullulans）［1］. 无菌操作下将菌接种于沙氏琼脂平皿及沙氏肉汤培养基上，35℃, 25℃分别孵育24, 48, 72, 96, 120 h和6 d，观察菌落生长情况. 将上述48 h培养菌落用接种针接种于玉米粉小培养基中，盖无菌盖玻片置无菌平皿中，加无菌湿纱布保温，35℃孵育48 h，直接在显微镜下观察生长形态.  将待检菌落，用接种环直接接种于含有碳源和氮源等生化鉴定反应管中，以葡萄糖作为对照管，置35℃孵育箱反应24~48 h，观察结果. 挑取待鉴定真菌与无菌蒸馏水制成混悬液，划线接种于含有放线菌酮的沙氏琼脂培养基上，接种量为一接种环. 另接种1管不含放线菌酮的沙氏琼脂培养基作为对照. 置25℃培养3 d，观察结果. 结果判定： 两管均有生长判为阳性，表示对放线菌酮不敏感，能耐受. 有放线菌酮的斜面无生长或比对照管生长差，判为阴性，表示对放线菌酮敏感. 将待检菌接种于沙氏琼脂斜面后，将斜面置室温（25℃）培养5 d或更长时间直至菌落形成，检查菌落形成和显微镜下形态，如为霉菌相生长判为阳性. 药物敏感性试验（微量稀释法） 按照 1995年NCCLS推荐的酵母菌微量稀释法抗真菌药物敏感试验 参考 方案进行. 抵抗力试验包括： ① 对温度耐受性试验；② 干燥试验；③ 紫外线照射试验. 另用9 g/L盐水制成菌悬液，并调整其浊度为0.5麦氏单位，取500 μL菌悬液，注入小鼠腹腔内，观察其侵袭力. 本菌24～48 h培养菌落，经革兰染色后呈阳性，大小为5～9 μm，孢子呈圆形、卵圆形或长圆形，菌丝块内可见芽生孢子，无子囊及子囊孢子.  沙氏琼脂生长菌落灰白色，表面光滑，呈小米粒状. 培养48 h后，菌落开始为酵母样薄膜生长，大小……