作者：胡廷辉　应敏刚　郑秋红　龚福生　谢云青

　树突状细胞（dendritic cell，DC）是已知功能最强的抗原呈递细胞，是机体T淋巴细胞特异免疫应答的直接启动和调控者，在机体的抗肿瘤免疫应答中发挥着重要作用。在体外培养DC并用肿瘤抗原致敏后，携带肿瘤抗原信息的DC，在体内外激活针对该肿瘤细胞的特异性杀伤细胞。本试验在体外用人胃癌细胞SGC提取肿瘤抗原致敏DC后诱导CIK，通过其对SGC的杀伤作用的 研究 为DC 治疗 胃癌的研究提供 理论 及试验依据。

    1 材料与 方法

    1.1 主要试剂

    SGC由福建省肿瘤 医院 分子生物学研究室提供；rhIL?鄄2、rhIL?鄄4、CD3 mAb购自Peprotech公司；rhGM?鄄CSF、Ficoll淋巴细胞分离液购自军事医学 科学 院；胎牛血清(超级)购自杭州四季青生物制品公司；人AB血清由福建省血液中心提供；1640培养基购自Gibco公司；FITC标记的小鼠抗人CD83、HLA?鄄DR、CD14、CD86及同亚型对照抗体购于晶美生物工程有限公司。

    1.2 方 法

    1.2.1 SGC的培养

    SGC在5％CO2、37℃条件下，用含有10％胎牛血清RPMI1640培养液常规培养。

    1.2.2 肿瘤细胞总蛋白的获取

    将培养贴壁肿瘤细胞用胰酶消化悬浮，离心弃上清，用无血清RPMI1640培养液重悬，超声破膜，30 000r/min超速离心90min，取上清。浓缩透析，调整蛋白浓度为25mg/ml，经0.22μm滤膜滤过除菌，－80℃保存。

    1.2.3 DC的培养[1]

    无菌条件下采集的正常人抗凝外周全血，经淋巴细胞分离液梯度离心，获取单……