作者：房佰俊，宋永平，曹莹，林全德，买玲

【摘要】  目的 体外定向诱导成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞向胰岛样细胞分化。方法 首先将成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞培养在含适当浓度的B27、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及表皮生长因子(EGF)的培养基中诱导，接着更换诱导培养基，用含适当浓度的β细胞调节素、尼克酰胺等高糖无血清培养基诱导细胞向胰岛样细胞分化。用RTPCR法检测诱导前后nestin、ngn3、胰岛素启动子因子1(IPF1)、胰岛素及胰高血糖素基因的表达；免疫荧光染色法检测诱导前后nestin、胰岛素及胰高血糖素的表达；放射免疫分析法检测诱导前后细胞分泌胰岛素情况。结果 成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞经第一阶段的诱导后可分化成nestin 阳性的祖细胞，继续诱导6d后变圆的细胞逐渐增多，并最终聚集成团。免疫荧光实验证明经诱导后的细胞表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素等内分泌激素；放免分析结果表明，诱导的胰岛样细胞团可以分泌胰岛素。结论 成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞具有胰腺干祖细胞的固有特征，极有可能作为种子细胞用糖尿病的细胞治疗。

【关键词】  干细胞；胰岛；脂肪

糖尿病是严重危害人类健康的常见多发病，目前临床对Ⅰ型糖尿病所用的胰岛素注射疗法并不能令人满意。 近几年，经肝内门静脉植入胰岛细胞治疗糖尿病取得了一些疗效 [1]，但遗憾的是，胰岛细胞移植仍面临诸多难题，如供者来源不足及严重的免疫排斥反应等。 因此，积极寻找新的胰岛细胞资源已成为当务之急。胚胎干细胞具有发育的全能性，可自发分化或经诱导分化为胰岛细胞[23]。另外，有学者[4]对胰管上皮细胞及胰岛细胞进行培养，诱导nestin阳性的胰腺干细胞分化为内分泌腺细胞。可见，胚胎干细胞和胰腺干细胞均可成为糖尿病细胞治疗的种子细胞。但是，它……