一种从感病昆虫血腔内获取金龟子绿僵菌(M. anisopliae)并构建其cDNA文库的新方法研究
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一种从感病昆虫血腔内获取金龟子绿僵菌(M. anisopliae)并构建其cDNA文库的新方法研究
论文目录
摘要
第1-6 页
ABSTRACT
第6-11 页
1 绪论
第11-31 页
· 引言
第11-12 页
· 研究的意义和背景
第12-13 页
· 国内外研究进展
第13-26 页
· 国内外研究病原真菌侵染分子机制所采用的方法学
第26-27 页
· 研究目的和总体思路
第27-28 页
· 研究内容和技术路线
第28 页
· 本研究的创新点
第28-31 页
2 材料与方法
第31-49 页
· 供试菌株与昆虫
第31 页
· 培养基
第31 页
· 主要仪器
第31-32 页
· 主要试剂
第32-34 页
· 基因组DNA 的制备与定量
第34-35 页
· mRNA 的提取
第35 页
· 引物设计及PCR 灵敏度分析
第35-39 页
· Milli Q 水对血细胞破裂的影响分析
第39 页
· 蝗虫血细胞的裂解及DNA 和RNA 降解技术路线
第39-40 页
· 正交试验
第40 页
· 绿僵菌侵染飞蝗及绿僵菌菌体的分离和验证
第40-41 页
· cDNA 文库构建
第41-49 页
3 结果
第49-67 页
· 引物的灵敏度与特异性分析结果
第49-51 页
· Milli Q 水洗涤对蝗虫血细胞破裂的影响
第51-53 页
· 单因子实验结果
第53-57 页
· 正交实验分析结果
第57-58 页
· 感病蝗虫绿僵菌菌体的分离及验证结果
第58-59 页
· 从感病蝗虫血淋巴中分离纯化到的绿僵菌菌体提取mRNA后进行RT-PCR 分析
第59-60 页
· 侵染真菌cDNA library 的构建
第60-62 页
· 文库中毒力基因的检测
第62-63 页
· 序列分析
第63-67 页
4 讨论
第67-75 页
· 感病蝗虫血淋巴中绿僵菌的分离和m RNA 的提取
第67-70 页
· cDNA 文库的构建
第70-71 页
· cDNA 测序及分析
第71-72 页
· 本文库在真菌致病基因研究中的应用
第72 页
· 小结
第72-75 页
5 结论与后续工作
第75-77 页
致谢
第77-79 页
参考文献
第79-91 页
附录
第91页
本篇论文共
91
页,
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