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禽流感病毒(H5N1)基因(h5n1a)在马铃薯中的转化与表达研究——附：乙肝表面抗原(HBsAg)基因转化的对比研究
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禽流感病毒(H5N1)基因(h5n1a)在马铃薯中的转化与表达研究——附：乙肝表面抗原(HBsAg)基因转化的对比研究
论文目录
 
中文摘要第1-10 页
英文摘要第10-14 页
1 前言第14-16 页
2 文献综述第16-38 页
　　2．1 植物遗传转化研究进展第16-26 页
　　　　2．1．1 转化方法第17-20 页
　　　　2．1．2 载体构建第20-23 页
　　　　2．1．3 受体材料的选择第23-24 页
　　　　2．1．4 影响转化的因素第24-25 页
　　　　2．1．5 转化体的筛选和鉴定第25-26 页
　　2．2 植物医药基因工程的研究进展第26-33 页
　　　　2．2．1 表达抗体第28-30 页
　　　　2．2．2 表达抗原第30-32 页
　　　　2．2．3 转化体系第32-33 页
　　2．3 马铃薯遗传转化的研究进展第33-35 页
　　2．4 禽流感病毒（H5N1）基因（h5n1a）及其疫苗的研究进展第35-36 页
　　2．5 植物医药基因工程的安全性问题第36-38 页
3 材料与方法第38-54 页
　　3．1 材料第38-42 页
　　　　3．1．1 植物材料第38 页
　　　　3．1．2 菌株与质粒第38 页
　　　　3．1．3 工具酶第38-39 页
　　　　3．1．4 主要化学试剂第39 页
　　　　3．1．5 主要仪器第39 页
　　　　3．1．6 主要溶液的配制第39-41 页
　　　　3．1．7 马铃薯组织培养中用到的培养基第41-42 页
　　3．2 方法第42-54 页
　　　　3．2．1 马铃薯再生系统的建立第42 页
　　　　3．2．2 植物双元表达载体的构建第42-45 页
　　　　3．2．3 双元质粒载体转化农杆菌第45-46 页
　　　　3．2．4 农杆菌转化子的鉴定第46-47 页
　　　　3．2．5 PCR扩增法制备生物素（地高辛）探针与纯化第47-49 页
　　　　3．2．6 基础抗性的测定、转化及转化体筛选第49 页
　　　　3．2．7 转化体的鉴定第49-54 页
4 结果与分析第54-72 页
　　4．1 马铃薯再生系统的优化第54-56 页
　　　　4．1．1 诱导分化第54-55 页
　　　　4．1．2 诱导结薯第55-56 页
　　4．2 转化方法的确定第56 页
　　4．3 载体的构建与鉴定第56-60 页
　　4．4 筛选剂的选择第60-61 页
　　4．5 转化条件的优化第61-63 页
　　　　4．5．1 菌株选择第61 页
　　　　4．5．2 条件筛选第61-63 页
　　4．6 转化体的筛选第63-64 页
　　4．7 整合表达检测第64-71 页
　　　　4．7．1 报告基因检测第64-66 页
　　　　4．7．2 目的基因PCR检测第66 页
　　　　4．7．3 DNA杂交检测第66-70 页
　　　　4．7．4 表达活性检测第70-71 页
　　4．8 小结第71-72 页
5 问题及讨论第72-75 页
　　5．1 取材问题第72 页
　　5．2 转化问题第72-73 页
　　5．3 转化体筛选问题第73-74 页
　　5．4 外源基因表达的检测问题第74-75 页
6 附录：乙型肝炎表面抗原基因（HbsAg-s）在马铃薯中的表达第75-85 页
参考文献第85-97 页
致谢第97页

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