论文目录 | |
摘要 | 第1-7
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Abstract | 第7-12
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第一章 绪论 | 第12-23
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· AT-HOOK蛋白的研究进展 | 第12-17
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· 拟南芥的基本特性 | 第17
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· 拟南芥开花调控途径 | 第17-20
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· 光周期途径 | 第18-19
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· 春化途径 | 第19
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· 自主途径 | 第19
页 |
· 赤霉素途径 | 第19-20
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· 拟南芥下胚轴生长的调控 | 第20-21
页 |
· 本研究的研究内容和策略 | 第21-23
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第二章 实验材料和方法 | 第23-42
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· 实验材料 | 第23-24
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· 植物材料 | 第23
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· 菌株及质粒 | 第23
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· 主要的分子生物学试剂和实验仪器 | 第23-24
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· 植物材料的种植和培养 | 第24
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· 实验方法 | 第24-42
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· 载体的构建 | 第24-26
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· PCR产物的回收和连接反应 | 第26
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· 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26
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· 连接产物的转化 | 第26
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· 克隆鉴定、质粒提取和测序 | 第26-27
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· 农杆菌感受态细胞的制备 | 第27
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· 农杆菌的转化及阳性克隆的鉴定 | 第27
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· 拟南芥的转化 | 第27
页 |
· DNA的提取 | 第27-28
页 |
· Trizol法提取RNA及纯化 | 第28-29
页 |
· cDNA第一链的合成 | 第29
页 |
· 基因组和质粒PCR | 第29
页 |
· 半定量RT-PCR | 第29
页 |
· 实时荧光定量PCR | 第29-30
页 |
· 突变体的筛选与鉴定 | 第30-31
页 |
· 转基因植株及突变体开花时间的表型分析 | 第31
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· 转基因植株及突变体下胚轴的表型分析 | 第31
页 |
· 转基因植株根的表型分析 | 第31
页 |
· 叶绿体的测定 | 第31-32
页 |
· 化学组织染色 | 第32
页 |
· 融合蛋白的表达纯化和抗体制备 | 第32-33
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· SDS-PAGE电泳和蛋白杂交 | 第33-36
页 |
· 植物总蛋白的提取 | 第36-37
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· 植物核蛋白的提取 | 第37
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· 蛋白的亚细胞定位 | 第37-38
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· 凝胶迁移滞后实验 | 第38
页 |
· 本研究所应用的引物序列 | 第38-42
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第三章 结果与分析 | 第42-72
页 |
· 生物信息学分析 | 第42-44
页 |
· 进化树分析 | 第42-43
页 |
· 氨基酸的序列比对 | 第43-44
页 |
· 突变体的筛选与鉴定 | 第44-45
页 |
· AT-HOOK蛋白对拟南芥开花时间的调控 | 第45-52
页 |
· AHL22基因过量表达植物的晚开花表型 | 第46-48
页 |
· AHL18基因过量表达延迟拟南芥开花 | 第48
页 |
· AHL27和AHL29基因过量表达延迟拟南芥的开花时间 | 第48-50
页 |
· 突变体和RNAi植株的开花表型 | 第50-52
页 |
· AT-HOOK基因对下胚轴伸长的抑制 | 第52-58
页 |
· AHL22抑制下胚轴的伸长 | 第52-53
页 |
· AHL22过表达植株中光受体和下胚轴相关基因的表达 | 第53-54
页 |
· AHL18,AHL27和AHL29抑制下胚轴的伸长 | 第54-56
页 |
· 双突变体和四突变体下胚轴的伸长 | 第56-58
页 |
· AHL22抑制主根的生长 | 第58-61
页 |
· AT-HOOK基因过表达对植株叶和花形态的影响 | 第61-63
页 |
· AT-HOOK基因的表达模式 | 第63-67
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· 利用生物信息学预测AT-hook基因在不同组织器官的表达模式 | 第63-65
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· GUS组织化学染色及mRNA表达水平的检测 | 第65-67
页 |
· AHL22基因的GUS组织化学染色和mRNA表达水平的检测 | 第65-66
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· AHL22在不同发育时期的表达模式 | 第66-67
页 |
· AHL27基因的启动子活性分析 | 第67
页 |
· AHL22和AHL27抗原抗体的制备 | 第67-68
页 |
· AT-HOOK蛋白的亚细胞定位 | 第68-71
页 |
· AHL22蛋白定位于细胞核 | 第68-69
页 |
· AHL27蛋白定位于细胞核 | 第69-70
页 |
· AHL18和AHL29蛋白定位于细胞核 | 第70-71
页 |
· AHL22和AHL27蛋白与富含AT碱基DNA序列的特异结合 | 第71-72
页 |
第四章 讨论 | 第72-76
页 |
· AHL18,AHL22,AHL27,AHL29是高度保守的AT-HOOK核定位蛋白 | 第72
页 |
· AT-HOOK基因的组织特异性表达决定它的功能 | 第72-73
页 |
· AT-HOOK蛋白对植物发育调控的功能多样性 | 第73-74
页 |
· AT-HOOK蛋白与目的基因的结合和调控作用 | 第74-76
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第五章 全文结论 | 第76-78
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· AHL18,AHL22,AHL27,AHL29四个蛋白有高度的序列相似性 | 第76
页 |
· AHL18,AHL22,AHL27,AHL29四个基因主要表达在根和花中 | 第76
页 |
· AHL18,AHL22,AHL27,AHL29四个蛋白为核定位蛋白 | 第76
页 |
· AHL18,AHL22,AHL27,AHL29调控拟南芥开花 | 第76-77
页 |
· AHL18,AHL22,AHL27,AHL29抑制下胚轴的伸长 | 第77
页 |
· AHL22抑制主根的生长 | 第77-78
页 |
参考文献 | 第78-87
页 |
致谢 | 第87-88
页 |
作者简历 | 第88页 |