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DHV-Ⅰ感染性分子克隆的建立及其衍生病毒的生物学特性研究

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DHV-Ⅰ感染性分子克隆的建立及其衍生病毒的生物学特性研究
论文目录
 
摘要第1-8 页
ABSTRACT第8-15 页
文献综述第15-51 页
  第一章 鸭Ⅰ型肝炎病毒研究进展第15-27 页
    · 病原研究第15-17 页
      · 病原形态学特性第15-16 页
      · 病毒的培养增殖第16 页
      · 病毒的纯化第16-17 页
    · DHV-Ⅰ基因组结构与功能第17-20 页
      · DHV-Ⅰ基因组非编码区第18-19 页
      · DHV-Ⅰ的编码区第19-20 页
    · 致病机理第20-22 页
    · DHV-Ⅰ病原检测第22-24 页
      · 血清学第22-23 页
      · 免疫学第23-24 页
      · 分子生物学方法第24 页
    · 防控方法第24-25 页
    · 研究方向与前景第25-27 页
  第二章 RNA 病毒的反向遗传操作研究研究进展第27-51 页
    · 感染性CDNA 克隆的构建基础第27-32 页
      · 病毒基因组全长cDNA 分子的扩增第28-31 页
      · 载体的选择第31-32 页
      · RNA 聚合酶系统的选择第32 页
      · 全长cDNA 分子的装配过程第32 页
    · 感染性转录物的产生第32-34 页
    · 影响感染性的因素第34-35 页
      · 转录物异质性第34 页
      · 基因突变第34 页
      · 5′端和3′端冗余序列第34 页
      · 帽子结构第34-35 页
      · VPg第35 页
    · 感染性分子克隆的应用第35-43 页
      · 病毒基因组结构与功能的研究第35-37 页
      · 分子致病机理的研究第37-39 页
      · 病毒与宿主互作的研究第39-40 页
      · 新型疫苗的研究第40-42 页
      · 病毒载体的研究第42-43 页
      · 基因治疗第43 页
    · RNA 病毒感染性克隆构建的国内外研究进展第43-49 页
      · 正链RNA 病毒感染性克隆研究进展第44-46 页
      · 负链RNA 病毒感染性克隆研究进展第46-47 页
      · 双链RNA 病毒感染性克隆研究进展第47-48 页
      · 逆转录病毒感染性克隆研究进展第48-49 页
    · 研究方向与前景第49-51 页
试验研究第51-101 页
  第三章 鸭Ⅰ型肝炎病毒ZJ-V/2006 在BHK-21 细胞上的分离与鉴定第51-59 页
    · 材料与方法第51-55 页
      · 材料第51-52 页
      · 方法第52-55 页
    · 结果第55-58 页
      · 病毒分离第55-56 页
      · 电镜观察第56 页
      · 间接免疫荧光试验第56-57 页
      · RT-PCR 鉴定第57 页
      · 序列分析第57-58 页
    · 讨论第58-59 页
  第四章 鸭Ⅰ型肝炎病毒(ZJ-V/2006)基因组全长CDNA 克隆的构建与分析第59-72 页
    · 材料与方法第59-68 页
      · 材料第59-60 页
      · 方法第60-68 页
    · 结果与分析第68-70 页
      · DHV-ⅠZJ-V/2006 株全长cDNA 序列各片段的RT-PCR 扩增第68 页
      · DHV-ⅠZJ-V/2006 株全长cDNA 的构建与鉴定第68-69 页
      · 序列分析第69-70 页
    · 讨论第70-72 页
  第五章 DHV-Ⅰ感染性克隆病毒的体外拯救与鉴定第72-83 页
    · 方法与材料第72-78 页
      · 材料第72-73 页
      · 方法第73-75 页
      · 拯救病毒的鉴定第75-78 页
    · 结果第78-81 页
      · 体外转录物RNA 完整性检测结果第78 页
      · 拯救病毒的鉴定第78-81 页
    · 讨论第81-83 页
  第六章 DHV-Ⅰ感染性克隆衍生病毒在BHK-21 细胞中的生物学特性研究第83-92 页
    · 材料第83-84 页
      · 质粒、细胞株及毒株第83 页
      · 主要试剂第83 页
      · 主要仪器与设备第83-84 页
    · 方法第84-87 页
      · BHK-21 细胞的培养与冻存第84 页
      · DHV-Ⅰ拯救病毒的传代第84-85 页
      · DHV-Ⅰ拯救病毒与母本病毒TCID50 的测定第85 页
      · DHV-Ⅰ拯救病毒动力学特性第85-87 页
      · 拯救病毒与母本病毒毒力的测定第87 页
    · 结果第87-91 页
      · DHV-Ⅰ亲本毒和拯救病毒的动力学特性第87-88 页
      · 实时荧光定量RT-PCR 结果第88-90 页
      · 拯救病毒的攻毒试验结果第90-91 页
    · 讨论第91-92 页
  第七章 鸭Ⅰ型肝炎病毒SYBR GREENⅠ实时荧光PCR 鉴别方法第92-101 页
    · 材料与方法第92-95 页
      · 毒株与细胞第92 页
      · 试剂第92 页
      · 引物的设计与合成第92-93 页
      · 标准品质粒的构建与鉴定第93 页
      · 病毒TCID50 的测定第93-94 页
      · 病毒RNA 的提取及反转录第94 页
      · SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR 反应体系的建立及优化第94 页
      · 标准曲线的制作第94-95 页
      · 特异性试验第95 页
      · 重复性试验第95 页
      · 敏感性试验第95 页
      · 临床样品的检测第95 页
    · 结果第95-99 页
      · 荧光定量PCR 引物的特异性第95-96 页
      · SYBR Green ⅠPCR 的优化第96 页
      · 标准曲线的绘制第96-97 页
      · SYBR Green ⅠPCR 的敏感性试验第97-98 页
      · SYBR Green ⅠPCR 的特异性试验第98-99 页
      · SYBR GreenⅠPCR 的重复性试验第99 页
      · 对病料样品的检测第99 页
    · 讨论第99-101 页
结论第101-102 页
参考文献第102-115 页
缩略词第115-117 页
致谢第117-118 页
作者简介第118 页

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