迟缓爱德华氏菌热激蛋白的克隆、表达与分析



迟缓爱德华氏菌热激蛋白的克隆、表达与分析

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迟缓爱德华氏菌热激蛋白的克隆、表达与分析

论文目录
摘要	第1-5页
Abstract	第5-8页
第一章前言	第8-22页
· 热激蛋白	第8-19页
· 热激蛋白的分类	第8页
· 热激蛋白的作用	第8-9页
· 热激蛋白40	第9-13页
· 热激蛋白70	第13-17页
· 热激蛋白90	第17-19页
· 迟缓爱德华氏菌的研究	第19-21页
· 迟缓爱德华氏菌的致病性	第19-21页
· 本论文的研究意义及研究目的	第21-22页
第二章迟缓爱德华氏菌dnaK、dnaJ、htpG的克隆分析及其表达纯化	第22-39页
· 材料和方法	第22-34页
· 基因克隆	第23-29页
· 迟缓爱德华氏菌基因组DNA的提取	第23-24页
· 基因的扩增	第24-25页
· 基因的序列鉴定和分析	第25-29页
· 基因在大肠杆菌中的表达	第29-33页
· 表达载体的构建	第29-31页
· 重组蛋白的诱导表达	第31-32页
· SDS-PAGE诱导表达结果分析	第32-33页
· 重组蛋白的纯化	第33-34页
· 结果和讨论	第34-39页
· 基因的克隆和序列分析	第34页
· 蛋白结构预测	第34-37页
· DnaJ蛋白结构	第34-35页
· DnaK蛋白结构	第35-36页
· HtpG蛋白结构	第36-37页
· 蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化	第37-39页
第三章迟缓爱德华氏菌DnaK与HtpG蛋白性质研究	第39-71页
· 材料和方法	第39-61页
· HtpG蛋白二聚体状态的鉴定	第39页
· Malachite green assay测定酶活	第39-40页
· 最适酶活温度的确定	第40-61页
· 材料与方法	第61-65页
· 不同温度培养条件下细菌的生长状况	第61页
· 对外源性H_2O_2的耐受能力	第61-62页
· 插入失活菌株毒力的动物实验检测	第62页
· 细菌在血液中的散播	第62页
· 对牙鲆的致死率	第62页
· 插入失活菌株和野生型菌株与巨噬细胞间的作用	第62-65页
· 巨噬细胞的提取及培养	第62-63页
· 巨噬细胞的活化	第63-64页
· 黏附与侵染巨噬细胞能力的检测	第64页
· 插入失活菌株对细胞因子的诱导作用	第64-65页
· 结果与讨论	第65-71页
· 高温对细菌生长的影响	第66-67页
· 对外源性H_2O_2的耐受能力	第67页
· 动物实验结果	第67-68页
· 侵染巨噬细胞	第68-71页
第七章 rDnaJ和rHtpG的抗原保护效应检测	第71-74页
· 材料和方法	第71-72页
· 重组蛋白保护效应的检测	第71页
· 重组蛋白在牙鲆体内产生特异性抗体的效价检测	第71-72页
· 结果和讨论	第72-74页
结论	第74-75页
附录—溶液的配置	第75-81页
参考文献	第81-88页
致谢	第88 页

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