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基于蛋白质组学中药寒热药性的研究

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基于蛋白质组学中药寒热药性的研究
论文目录
 
英汉缩略语对照表第1-11页
摘要第11-14页
ABSTRACT第14-18页
前言第18-20页
第1章 文献综述第20-29页
  1.1 蛋白质组学及研究技术第20-21页
    1.1.1 双向凝胶电泳技术第20-21页
    1.1.2 相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)技术第21页
  1.2 生物质谱技术第21-22页
  1.3 生物信息学第22页
  1.4 中药四性药理作用研究第22-24页
    1.4.1 寒性、热性中药对中枢神经递质的影响第23页
    1.4.2 寒性、热性中药对交感神经神经系统的影响第23页
    1.4.3 寒性、热性中药对能量代谢的影响第23-24页
    1.4.4 寒性、热性中药对内分泌系统的影响第24页
  1.5 iTRAQ技术在蛋白质组学的应用第24-25页
  1.6 蛋白质组学在中医药研究中的应用第25-26页
  1.7 展望第26-29页
第2章 典型寒性、热性中药对正常、寒证及热证大鼠生理生化指标的影响第29-65页
  2.1 实验材料第29-32页
    2.1.1 实验仪器第29-30页
    2.1.2 实验试剂第30-31页
    2.1.3 实验中药材第31-32页
  2.2 实验方法第32-36页
    2.2.1 中药材制备第32-33页
    2.2.2 检测指标的选择第33页
    2.2.3 分组及给药第33-34页
      2.2.3.1 附子、干姜、花椒、黄连、黄芩、黄柏对正常大鼠实验分组及给药第33页
      2.2.3.2 附子、干姜、花椒、黄连、黄芩、黄柏对寒证大鼠实验分组及给药第33-34页
      2.2.3.3 附子、干姜、花椒、黄连、黄芩、黄柏对热证大鼠实验分组及给药第34页
      2.2.3.4 寒性、平性中药对大鼠机体的影响第34页
    2.2.4 大鼠一般状况观察第34页
    2.2.5 实验取材第34-35页
    2.2.6 对大鼠血液生化指标的影响第35页
    2.2.7 酶联免疫法检测血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)第35页
    2.2.8 病理组织学观察第35-36页
    2.2.9 对大鼠肝组织三磷酸腺苷酶的影响第36页
      2.2.9.1 对照品溶液的制备第36页
      2.2.9.2 样品溶液的制备第36页
      2.2.9.3 色谱条件第36页
      2.2.9.4 对大鼠肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力的影响第36页
  2.3 统计学分析第36-37页
  2.4 对正常大鼠机体的影响第37-42页
  2.5 对寒证大鼠机体的影响第42-49页
  2.6 对热证大鼠机体的影响第49-57页
  2.7 其他寒性、平性中药对大鼠机体的影响第57-62页
  2.8 小结第62-65页
第3章 基于蛋白质组学的寒性、热性中药的性味研究第65-126页
第一节 寒性、热性中药对肝脏蛋白质组学的影响第65-93页
  1.1 实验材料及实验动物分组第65-67页
    1.1.1 实验药品第65-66页
    1.1.2 实验试剂及耗材第66页
    1.1.3 主要仪器设备第66-67页
    1.1.4 中药水煎液的制备第67页
    1.1.5 实验动物分组及给药第67页
  1.2 实验方法第67-69页
    1.2.1 样品处理第67-68页
    1.2.2 样品酶解实验步骤第68页
    1.2.3 标记步骤第68页
    1.2.4 高pH反相分级第68-69页
    1.2.5 纳升级反相色谱-TripleTOFTM 5600进行蛋白质分析第69页
    1.2.6 数据库搜索第69页
  1.3 实验结果第69-72页
    1.3.1 SDS-PAGE检测蛋白完整性第69-70页
    1.3.2 ProteinPilot~(TM) 4.5展示的蛋白搜索结果第70页
    1.3.3 蛋白定量匹配肽段第70-71页
    1.3.4 匹配肽段质谱图第71-72页
  1.4 热性中药差异蛋白分析第72-85页
  1.5 寒性中药差异蛋白分析第85-93页
第二节 寒性、热性中药对药物代谢酶的影响第93-101页
  2.1 实验材料第94页
  2.2 实验方法第94页
  2.3 实验结果第94-97页
    2.3.1 黄连、黄芩、黄柏对药物代谢酶的影响第94-96页
    2.3.2 黄连、黄芩、黄柏药理作用分析第96页
    2.3.3 附子、干姜、花椒对肝脏药物代谢酶的影响第96-97页
  2.4 寒性、热性中药对物质代谢和能量代谢的影响第97-98页
  2.5 黄连、黄芩、黄柏肝微粒体中差异蛋白相互作用分析第98-99页
  2.6 附子、干姜、花椒肝微粒体中差异蛋白相互作用分析第99-101页
第三节 寒性、热性中药对下丘脑蛋白质的影响第101-116页
  3.1 实验材料第102页
  3.2 实验方法第102页
  3.3 实验结果第102-109页
    3.3.1 SDS-PAGE检测蛋白完整性第102页
    3.3.2 黄连、黄芩、黄柏在下丘脑中共有差异蛋白第102-104页
    3.3.3 黄连、黄芩、黄柏共有差异蛋白的药理作用分析第104-105页
    3.3.4 黄连、黄芩、黄柏对机体物质代谢和能量代谢的影响第105-107页
    3.3.5 黄连、黄芩、黄柏下丘脑中差异蛋白相互作用分析第107-109页
  3.4 热性中药实验结果第109-116页
    3.4.1 附子、干姜、花椒在下丘脑中共有的差异蛋白第109-111页
    3.4.2 附子、干姜、花椒共有差异蛋白的药理作用分析第111-112页
    3.4.3 附子、干姜、花椒对机体物质代谢和能量代谢的影响第112-114页
    3.4.4 附子、干姜、花椒下丘脑中的差异蛋白相互作用分析第114-116页
第四节 寒性、热性中药对血清蛋白质组学的影响第116-126页
  4.1 实验材料第116页
  4.2 实验方法第116页
  4.3 实验结果第116-119页
    4.3.1 SDS-PAGE检测蛋白完整性第116-117页
    4.3.2 黄连、黄芩、黄柏在血清中共有差异蛋白第117页
    4.3.3 差异蛋白的药理作用分析第117-118页
    4.3.4 差异蛋白相互作用分析第118-119页
  4.4 热性中药实验结果第119-121页
    4.4.1 附子、干姜、花椒在血清中的差异蛋白第119-120页
    4.4.2 差异蛋白药理作用分析第120页
    4.4.3 差异蛋白相互作用分析第120-121页
  4.5 小结第121-126页
第4章 CYP1A2、CYP2E1在肝脏的表达第126-132页
1 实验材料第126页
  1.1 实验仪器第126页
  1.2 实验试剂第126页
2 实验方法第126-127页
  2.1 样本处理第126页
  2.2 免疫组化第126-127页
  2.3 数据处理第127页
3 实验结果第127-132页
  3.1 CYP1A2、CYP2E1在肝脏组织中的表达第128-129页
  3.2 CYP1A2、CYP2E1在其他寒性中药、平性中药肝脏组织中的表达第129-132页
第5章 基于蛋白质组学的寒性、热性中药的差异性研究第132-157页
第一节 寒性、热性中药在肝脏中的差异性第132-143页
  1.1 实验材料第132页
  1.2 实验方法第132页
  1.3 实验结果第132-139页
    1.3.1 黄连、黄芩、黄柏在肝脏中的差异性第132-135页
    1.3.2 差异蛋白分析第135-139页
  1.4 热性中药实验结果第139-143页
    1.4.1 附子、干姜、花椒在肝脏中的差异性第139-141页
    1.4.2 差异蛋白分析第141-143页
第二节 寒性、热性中药在肝微粒中的差异性第143-146页
  2.1 实验材料第143页
  2.2 实验方法第143页
  2.3 实验结果第143-146页
    2.3.1 黄连、黄芩、黄柏在肝微粒体中的差异性第143-145页
    2.3.2 附子、干姜、花椒在肝微粒体中的差异性第145-146页
第三节 寒性、热性中药下丘脑中的差异性第146-150页
  3.1 实验材料第146页
  3.2 实验方法第146页
  3.3 实验结果第146-148页
    3.3.1 黄连、黄芩、黄柏在下丘脑中的差异性第146-147页
    3.3.2 差异蛋白分析第147-148页
  3.4 热性中药实验结果第148-150页
    3.4.1 附子、干姜、花椒在下丘脑中的差异性第148-149页
    3.4.2 差异蛋白分析第149-150页
第四节 寒性、热性中药在血清中的差异性第150-157页
  4.1 实验材料第150页
  4.2 实验方法第150页
  4.3 实验结果第150-151页
    4.3.1 黄连、黄芩、黄柏在血清中的差异性第150页
    4.3.2 差异蛋白分析第150-151页
  4.4 热性中药实验结果第151-153页
    4.4.1 附子、干姜、花椒在血清中的差异性第151-152页
    4.4.2 差异蛋白分析第152-153页
  4.5 小结第153-157页
第6章 黄连、黄芩、黄柏保肝作用第157-166页
1 材料与动物处理第157-158页
  1.1 实验药品第157页
  1.2 实验试剂及仪器第157-158页
2 实验方法第158-159页
  2.1 实验动物分组及给药第158页
    2.1.1 黄药子致肝毒性大鼠实验分组及给药第158页
    2.1.2 对乙酰氨基酚致肝毒性大鼠实验分组及给药第158页
  2.2 样品制备第158页
  2.3 生化指标检测第158-159页
  2.4 检测肝脏中GSH和MDA的含量第159页
  2.5 数据处理第159页
3 实验结果第159-166页
  3.1 黄药子致肝毒性实验结果第159-161页
  3.2 对乙酰氨基酚致肝毒性实验结果第161-166页
讨论第166-173页
结论第173-176页
展望第176-177页
致谢第177-178页
参考文献第178-184页
附图第184-190页
个人简历第190页

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