论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 引言 | 第12-34页 |
| 一、肾癌研究进展 | 第13-14页 |
| 二、肾癌的治疗现状 | 第14-15页 |
| 三、肾细胞癌的表观遗传研究 | 第15页 |
| 四、基因甲基化与肾细胞癌 | 第15-17页 |
| 五、TET1的研究进展 | 第17-23页 |
| 参考文献 | 第23-34页 |
| 第一部分 TET1在肾癌组织中的表达 | 第34-51页 |
| 一、材料和仪器 | 第34-38页 |
| （一）一般资料 | 第34-35页 |
| （二）实验仪器 | 第35-36页 |
| （三）实验试剂 | 第36-38页 |
| 二、实验方法 | 第38-45页 |
| （一）q RT–PCR检测TET1m RNA表达 | 第38-40页 |
| （二）Western blot检测TET1的蛋白表达 | 第40-43页 |
| （三）免疫组化检测TET1蛋白的表达和分布 | 第43-45页 |
| （四）统计方法 | 第45页 |
| 三、实验结果 | 第45-48页 |
| （一）q RT-PCR检测TET1在肾透明细胞癌及癌旁正常组织中的m RNA表达 | 第45-46页 |
| （二）Western blot检测TET1蛋白在肾透明细胞癌组织及癌旁组织中的表达 | 第46-47页 |
| （三）免疫组化检测TET1在肾透明细胞癌及癌旁组织中的表达 | 第47-48页 |
| 四、讨论 | 第48-49页 |
| 五、小结 | 第49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第二部分 肾癌TET1低表达在临床中的意义 | 第51-56页 |
| 一、实验材料 | 第51页 |
| 二、统计方法 | 第51页 |
| 三、实验结果 | 第51-54页 |
| 四、讨论 | 第54页 |
| 五、小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 第三部分 TET1对肾癌细胞功能及肿瘤进展的影响 | 第56-67页 |
| 一、实验材料 | 第56-59页 |
| （一）一般材料 | 第56页 |
| （二）主要试剂、耗材 | 第56-57页 |
| （三）主要仪器设备 | 第57-58页 |
| （四）主要试剂配制 | 第58-59页 |
| 二、实验方法 | 第59-61页 |
| （一）细胞培养 | 第59页 |
| （二）CCK-8 法检測细胞增殖活性 | 第59-60页 |
| （三）Transwell检测细胞迁移和侵袭能力 | 第60页 |
| （四）q RT-PCR法检测TET1 m RNA的表达 | 第60页 |
| （五）蛋白印迹（Western blot，WB） | 第60页 |
| （六）统计方法 | 第60-61页 |
| 三、实验结果 | 第61-63页 |
| （一）TET1蛋白在肾癌细胞系ACHN和 293T中的表达 | 第61-62页 |
| （二）肾癌细胞系ACHN和 293T增殖能力比较 | 第62页 |
| （三）肾癌细胞系ACHN和 293T迁移和侵袭能力 | 第62-63页 |
| 四、讨论 | 第63-65页 |
| 五、小结 | 第65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 第四部分 TET1蛋白对肾癌细胞的凋亡和侵袭能力的影响及可能的分子机制 | 第67-77页 |
| 一、实验材料 | 第67页 |
| 二、实验方法 | 第67-68页 |
| （一）TET1过表达载体的构建 | 第67页 |
| （二）细胞转染 | 第67-68页 |
| （三）蛋白质印迹（WB）法检测 | 第68页 |
| （四）Annexin V/PI法检测细胞凋亡 | 第68页 |
| （五）Transwell检测细胞迁移和侵袭能力 | 第68页 |
| （六）统计方法 | 第68页 |
| 三、实验结果 | 第68-72页 |
| （一）肾癌细胞中TET1表达及过表达情况 | 第68-70页 |
| （二）转染过表达质粒后的细胞凋亡分析 | 第70页 |
| （三）肾癌细胞系ACHN过表达TET1蛋白后的细胞迁移和侵袭能力 | 第70-71页 |
| （四）肾癌细胞系ACHN过表达TET1对Wnt信号通路的影响 | 第71-72页 |
| 四、讨论 | 第72-74页 |
| 五、小结 | 第74页 |
| 总结与展望 | 第74页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
| 综述 | 第77-86页 |
| 一、TET家族蛋白的概念及结构 | 第77-78页 |
| 二、TET家族蛋白去甲基化机制 | 第78-79页 |
| 三、TET家族蛋白与肿瘤的关系 | 第79-81页 |
| 四、TET家族蛋白与大脑发育的关系 | 第81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 英文缩略词表 | 第86-87页 |
| 攻读学位期间公开发表的SCI论文 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
