论文目录 | |
| 提要 | 第1-5
页 |
| 英文略缩词表 | 第5-11
页 |
| 第一部分 蛋白质酪氨酸磷酸激酶ALK 激酶结构域的克隆表达，抑制剂筛选及表征 | 第11-73
页 |
| 第一章 前言 | 第11-19
页 |
| 第一节 蛋白质激酶简介 | 第12
页 |
| 第二节 受体型蛋白质激酶 | 第12-13
页 |
| 第三节 间变性淋巴瘤激酶简介 | 第13-14
页 |
| 第四节 ALK 的基因和蛋白表达以及功能 | 第14-16
页 |
| 第五节 ALK 与癌症 | 第16-18
页 |
| 1. 间变性大细胞淋巴瘤 | 第16-17
页 |
| 2. 非小细胞肺癌(NSCL) | 第17
页 |
| 3. 神经母细胞瘤(Neuroblastoma) | 第17-18
页 |
| 第六节 研究目的 | 第18-19
页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-40
页 |
| 第一节 实验材料 | 第19-23
页 |
| 1. 试剂 | 第19
页 |
| 2. 引物设计 | 第19-20
页 |
| 3. 克隆过程中所涉及到得菌种以及细胞系 | 第20
页 |
| 4. DH5α感受态细胞的制备 | 第20
页 |
| 5. 培养基以及部分试剂的配制 | 第20-21
页 |
| 6. 碱裂解法小量制备质粒溶液 | 第21-22
页 |
| 7. Western Blot 相关试剂 | 第22
页 |
| 8. 实验中常用的相关试剂盒 | 第22
页 |
| 9. 常用仪器 | 第22-23
页 |
| 第二节 实验方法 | 第23-40
页 |
| 1. ALK催化结构域(ALK-cat)的克隆 | 第23-29
页 |
| 2. ALK催化结构域ALK-cat 在SF9（昆虫细胞）中表达与活性检测 | 第29-32
页 |
| 3. ALK-cat 抑制剂的筛选 | 第32-33
页 |
| 4. 抑制剂与已知的靶向性激酶抑制剂类药物的比较 | 第33
页 |
| 5. ALK抑制剂的细胞学表征 | 第33-35
页 |
| 6. ALK抑制剂对细胞信号通路的影响 | 第35-36
页 |
| 7. ALK突变体ALK-cat-F1174L 和ALK-cat-R1275Q 的研究 | 第36-38
页 |
| 8. ALK抑制剂对ALK 突变体的不同敏感度分析 | 第38
页 |
| 9. 对ALK-cat-F1174L 和ALK-cat-R1275Q 进行抑制剂筛选 | 第38-40
页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-66
页 |
| 第一节 ALK 的克隆、表达与活性鉴定 | 第40-47
页 |
| 1. ALK-cat 的克隆 | 第40-45
页 |
| 2. ALK-cat 在昆虫细胞内的表达 | 第45-47
页 |
| 第二节 ALK-cat 抑制剂的筛选 | 第47-50
页 |
| 1. 初步筛选 | 第47-48
页 |
| 2. 二次筛选 | 第48-49
页 |
| 3. 三次筛选 | 第49-50
页 |
| 第三节 ALK 抑制剂C7（G06976）的表征 | 第50-60
页 |
| 1. C7 以及应用中的抗癌药物对ALK 活性抑制能力的比较 | 第50-52
页 |
| 2. G06976 对ALK 阳性细胞生长的影响 | 第52-60
页 |
| 第四节 ALK 突变体的活性研究以及抑制剂筛选 | 第60-66
页 |
| 1. ALK突变体ALK-cat-F1174L，ALK-catR1275Q 表达以及活性分析. | 第60-61
页 |
| 2. ALK抑制剂G06976 对ALK 突变体的抑制效果 | 第61
页 |
| 3. ALK突变体抑制剂的筛选 | 第61-66
页 |
| 第四章 结论 | 第66-67
页 |
| 参考文献 | 第67-73
页 |
| 第二部分 蛋白质酪氨酸磷酸激酶MET 激酶结构域的克隆、表达及抑制剂筛选 | 第73-96
页 |
| 第一章 前言 | 第73-81
页 |
| 第一节 蛋白质酪氨酸磷酸激酶MET 简介 | 第73-79
页 |
| 1. Met 的结构特征 | 第73-75
页 |
| 2. Met 参与的细胞信号转导通路与基因表达 | 第75-79
页 |
| 第二节 蛋白质酪氨酸磷酸激酶MET 与癌症 | 第79-80
页 |
| 第三节 研究目的与意义 | 第80-81
页 |
| 第二章 实验材料与实验方法 | 第81-85
页 |
| 第一节 实验材料 | 第81
页 |
| 1. 常规试剂 | 第81
页 |
| 2. 试剂 | 第81
页 |
| 3. 用于扩增目的基因MET 的引物 | 第81
页 |
| 第二节 实验方法 | 第81-85
页 |
| 1. METcat 的克隆、表达以及重组病毒的纯化和活性鉴定 | 第81-83
页 |
| 2. 抑制剂筛选 | 第83-85
页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第85-92
页 |
| 第一节 MET 的克隆表达与病毒纯化 | 第85-87
页 |
| 1. MET 的克隆 | 第85-86
页 |
| 2. MET 催化结构域的表达与病毒纯化 | 第86-87
页 |
| 第二节 MET 的抑制剂筛选 | 第87-91
页 |
| 1. 初步筛选 | 第87-88
页 |
| 2. 二次筛选 | 第88-89
页 |
| 3. 抑制剂对METcat 激酶活性抑制能力的分析 | 第89-91
页 |
| 第三节 小结 | 第91-92
页 |
| 第四章 结论 | 第92-93
页 |
| 参考文献 | 第93-96
页 |
| 第三部分 受体型蛋白质酪氨酸磷酸酶PTPRU 细胞内结构域的表达与表征.. | 第96-110
页 |
| 第一章 前言 | 第96-100
页 |
| 第一节 蛋白质酪氨酸磷酸酶PTPRU | 第96-99
页 |
| 第二节 研究目标 | 第99-100
页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第100-102
页 |
| 第一节 实验材料 | 第100
页 |
| 第二节 实验方法 | 第100-102
页 |
| 1. PTPRU 的克隆 | 第100-101
页 |
| 2. PTPRU 的融合表达 | 第101-102
页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第102-107
页 |
| 第一节 PTPRU 的克隆与表达 | 第102-104
页 |
| 1. PTPRU 克隆 | 第102-103
页 |
| 2. GST-PTPRU 在E.coli 中的表达 | 第103-104
页 |
| 第二节 PTPRU 多个细胞内结构域在C057 中的表达 | 第104-106
页 |
| 第三节 PTPRU 的细胞学功能研究 | 第106-107
页 |
| 第四章 结论 | 第107-108
页 |
| 参考文献 | 第108-110
页 |
| 攻博期间发表的学术论文 | 第110-111
页 |
| 致谢 | 第111-113
页 |
| 中文摘要 | 第113-115
页 |
| ABSTRACT | 第115-116
页 |
