论文目录 | |
中文摘要 | 第1-5
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Abstract | 第5-12
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第一章 文献综述 | 第12-36
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· 细胞色素P450 酶系与细胞色素P450 | 第12-15
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· 细胞色素P450 酶系 | 第12-13
页 |
· 细胞色素P450 | 第13
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· P450 的类型 | 第13-14
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· 细胞色素P450 的系统命名 | 第14-15
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· P450 种类的多样性 | 第15
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· 昆虫细胞色素P450 基因的研究进展 | 第15-25
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· 昆虫细胞色素P450 基因的基本特性 | 第16-18
页 |
· 昆虫细胞色素P450 的表达 | 第18-20
页 |
· 昆虫P450 基因表达的调控机制 | 第20-23
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· 昆虫细胞色素P450 的功能 | 第23-24
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· 在昆虫取食中的作用 | 第23-24
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· 在昆虫抗药性中的作用 | 第24
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· P450 介导抗性的分子基础 | 第24-25
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· 家蚕细胞色素P450 的研究进展 | 第25-28
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· 目前家蚕P450 的研究进展 | 第26-27
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· 本研究室的工作 | 第27-28
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· 实时荧光定量PCR(REAL-TIME QUANTITATIVE PCR)技术 | 第28-36
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· PCR 技术从定性到定量的飞跃 | 第28-30
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· 荧光定量PCR 的荧光化学方法 | 第30-32
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· 实验原理 | 第32-33
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· 荧光定量PCR 的定量方法 | 第33-36
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第二章 引言 | 第36-46
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· 研究的目的意义 | 第36-39
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2.1.1.家蚕 P450 基因 CYP305B1 的基因组序列的研究 | 第36-37
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· 家蚕P450 基因的定量研究 | 第37-39
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· 实验材料、常用试剂及常规实验技术 | 第39-46
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· 实验用杀虫剂和氟化物 | 第39-40
页 |
· 常用试剂及其配制 | 第40-42
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· 常用基础分子生物学实验技术 | 第42-46
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第三章 家蚕P450 基因CYP305B1 的基因组序列克隆及其结构分析 | 第46-55
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· 实验材料 | 第47
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· 供试家蚕 | 第47
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· 试剂 | 第47
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· 实验技术线路和方法 | 第47-50
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· 实验技术线路 | 第47-48
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· 实验方法 | 第48-50
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· 实验结果和分析 | 第50-54
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· 分段PCR 和反向PCR 结果 | 第50-51
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· 家蚕CYP305B1 的基因结构 | 第51-52
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· 家蚕CYP305B1 的5’侧翼序列 | 第52-53
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· 内含子比较 | 第53-54
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· 讨论 | 第54-55
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· CYP305B1 基因结构分析与比对 | 第54
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· 关于实验方法的思考 | 第54-55
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第四章 实时定量PCR 方法比较的研究 | 第55-69
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· 实验材料与试剂 | 第55-56
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· 材料 | 第55-56
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· 试剂 | 第56
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· 实验技术线路和方法 | 第56-61
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· 实验技术线路 | 第56-57
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· 引物设计 | 第57-58
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· 体外转录及外源跟踪标定基因mRNA/DNA 混合物的的制备 | 第58-59
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· 核酸提取 | 第59-60
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· 逆转录 | 第60
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· 实时荧光定量PCR | 第60
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· 标准曲线线制备 | 第60
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· 数据计算及分析 | 第60-61
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· 实验结果和分析 | 第61-66
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· 标准曲线 | 第61-62
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· A3, GAPDH ,28S rRNA 基因在不同组织器官中转录水平 | 第62-65
页 |
· 外源跟踪标定基因mRNA/DNA 和内源参照基因的测定比较 | 第65-66
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· 讨论 | 第66-69
页 |
· 基因的双跟踪标定定量PCR 和表观转录活性 | 第66-67
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· 基因的表观转录活性值的含义 | 第67
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· 基因的表观转录活性测定时应注意的问题 | 第67-68
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· 基因的表观转录活性和利用内源参照基因的相对测定方法的比较 | 第68-69
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第五章 杀虫剂诱导下的P450 基因的转录水平的测定 | 第69-92
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· 实验材料与试剂 | 第69-70
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· 材料 | 第69-70
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· 试剂 | 第70
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· 实验原理和方法 | 第70-74
页 |
· 实验技术线路 | 第70-71
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· 引物设计 | 第71-72
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· 体外转录及外双跟踪标定基因mRNA/DNA 混合物的的制备 | 第72
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· 实验样品的提取 | 第72-73
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· 逆转录 | 第73-74
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· 实时荧光定量PCR | 第74
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· 标准曲线线制备 | 第74
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· 数据计算及分析 | 第74
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· 实验结果和分析 | 第74-89
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· 不同组织的P450 表观转录水平 | 第74-77
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· 不蚕品种家蚕以及野桑蚕的P450 的正常转录水平 | 第77-80
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· 不同组织的杀虫剂诱导效果 | 第80-84
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· 不同P450 的诱导效果 | 第84-89
页 |
· 讨论 | 第89-92
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第六章 氟化物诱导的P450 基因的转录水平 | 第92-112
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· 实验材料和试剂 | 第92-93
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· 材料 | 第92
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· 试剂 | 第92-93
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· 实验原理和方法 | 第93-97
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· 实验技术线路 | 第93-94
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· 引物设计 | 第94-95
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· 体外转录及外源跟踪标定基因mRNA/DNA 混合物的的制备 | 第95
页 |
· 实验样品的提取 | 第95-96
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· 逆转录 | 第96
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· 实时荧光定量PCR | 第96-97
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· 标准曲线制作 | 第97
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· 数据计算及分析 | 第97
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· 实验结果的分析 | 第97-110
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· 不同P450 基因的NaF 的诱导效果 | 第97-103
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· 不同组织器官P405 基因的NaF 诱导效果 | 第103-110
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· 讨论 | 第110-112
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结论 | 第112-114
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参考文献(REFERNCES) | 第114-122
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攻读学位期间发表的论文 | 第122-123
页 |
附录 | 第123-135
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致谢 | 第135
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