论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-5
页 |
| English Abstract | 第5-13
页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-44
页 |
| · 海绵生物学特性简介 | 第13-18
页 |
| · 海绵的分类、分布与进化 | 第13-14
页 |
| · 海绵的形态与组织结构 | 第14-16
页 |
| · 海绵的生理与生殖发育 | 第16-18
页 |
| · 海绵在药物开发及其它领域的研究 | 第18-23
页 |
| · 海绵在药物开发中的研究 | 第18-20
页 |
| · 海绵硅材料与硅酶的研究 | 第20-23
页 |
| · 海绵在海洋环境领域中的研究 | 第23
页 |
| · 中国海绵的研究 | 第23-25
页 |
| · 中国海绵的资源分布 | 第23-24
页 |
| · 中国海绵天然产物研究 | 第24-25
页 |
| · 中国海绵研究面临的问题 | 第25
页 |
| · 动物细胞培养 | 第25-31
页 |
| · 动物细胞培养技术概况 | 第25-27
页 |
| · 动物细胞培养的研究进展 | 第27-30
页 |
| · 海洋无脊椎动物细胞培养的现状和困难 | 第30-31
页 |
| · 海绵细胞离体培养技术的研究 | 第31-43
页 |
| · 海绵细胞离体培养技术的发展 | 第31-34
页 |
| · 海绵细胞团离体培养的技术方法 | 第34-35
页 |
| · 海绵细胞团离体培养的现状 | 第35-42
页 |
| · 海绵细胞团离体培养中存在的主要问题 | 第42-43
页 |
| · 论文研究背景和计划 | 第43-44
页 |
| 第二章 海绵细胞离体培养定量研究方法的建立 | 第44-59
页 |
| · 引言 | 第44
页 |
| · 实验材料 | 第44-45
页 |
| · 实验方法 | 第45-49
页 |
| · MTT法反应条件的考察 | 第45-46
页 |
| · 光密度法检测细胞生物量的条件 | 第46-47
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| · 细胞直接计数与MTT法、光密度法的比较 | 第47-48
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| · 5-BrdU掺入法检测海绵细胞增殖 | 第48
页 |
| · 端粒酶活性检测海绵细胞增殖潜力 | 第48-49
页 |
| · 结果与讨论 | 第49-58
页 |
| · MTT法的反应条件 | 第49-51
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| · 光密度法适用条件 | 第51-53
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| · MTT法、光密度法、直接计数法的比较 | 第53-55
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| · 5-BrdU掺入法检测海绵细胞增殖 | 第55-56
页 |
| · 端粒酶活性检测海绵细胞增殖潜力 | 第56-58
页 |
| · 小结 | 第58-59
页 |
| 第三章 海绵混合细胞团成团生长基本规律的研究 | 第59-69
页 |
| · 引言 | 第59
页 |
| · 实验材料 | 第59-60
页 |
| · 方法 | 第60-62
页 |
| 1 细胞离散 | 第60
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| 2 MCP Primmorph成团的关键因素 | 第60-61
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| 3 MCP Primmorph形成过程的显微镜观察 | 第61-62
页 |
| · 结果与讨论 | 第62-68
页 |
| · MCP Primmorph形成动态观察 | 第62-64
页 |
| · MCP Primmorph形成过程的团尺寸变化 | 第64-65
页 |
| · 接种密度对MCP Primmorph形成的影响 | 第65
页 |
| · EDTA离散细胞对MCP成团的影响 | 第65-66
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| · 海绵健康状况对MCP Primmorph形成的影响 | 第66
页 |
| · 培养温度对MCP Primmorph形成的影响 | 第66
页 |
| · 接种密度对MCP Primmorph形成的影响 | 第66-67
页 |
| · 其它因素对MCP Primmorph形成的影响 | 第67-68
页 |
| · 小结 | 第68-69
页 |
| 第四章 混合细胞细胞团原代培养营养、生长与代谢特征 | 第69-90
页 |
| · 引言 | 第69
页 |
| · MCP Primmorph培养的营养需求 | 第69-83
页 |
| · 引言 | 第69
页 |
| · 实验材料 | 第69-70
页 |
| · 方法 | 第70-72
页 |
| · 结果与讨论 | 第72-83
页 |
| · MCP Primmorph36h培养的营养考察 | 第72-77
页 |
| · 5天期MCP Primmorph培养的营养考察 | 第77-80
页 |
| · 组合培养基的5天期培养 | 第80-83
页 |
| · MCP Primmorph的生长与代谢特征 | 第83-88
页 |
| · 引言 | 第83
页 |
| · 实验方法 | 第83-85
页 |
| 1 细胞离散与培养 | 第83-84
页 |
| 2 MTT细胞活性检测 | 第84
页 |
| 3 5-BrdU免疫组化检测增殖细胞比例 | 第84
页 |
| 4 总蛋白表征的基础代谢检测 | 第84
页 |
| 5 色素合成能力表征的次生代谢能力检测 | 第84-85
页 |
| · 结果与讨论 | 第85-88
页 |
| 1 Suberites d.细胞培养中的MTT检测的细胞活性动力学特征 | 第85-86
页 |
| 2 Suberites d.细胞培养中的5-BrdU检测的细胞增殖规律 | 第86
页 |
| 3 Suberites d.细胞培养中的总蛋白代谢特征 | 第86-87
页 |
| 4 Suberites d.细胞培养中的色素代谢为代表的次生代谢动力学 | 第87-88
页 |
| · 小结 | 第88-90
页 |
| 第五章 富集海绵原细胞(ADCP)的成团、培养与增殖研究 | 第90-114
页 |
| · 引言 | 第90
页 |
| · Ficoll分离与富集原细胞方法研究 | 第90-98
页 |
| · 实验材料与方法 | 第90-91
页 |
| · 结果与讨论 | 第91-98
页 |
| 1 梯度密度离心条件的选择 | 第91-93
页 |
| 2 梯度密度离心细胞的类型鉴别 | 第93-98
页 |
| · ADCP Primmorph与MCP Primmorph对比培养 | 第98-108
页 |
| · 实验材料与方法 | 第98-100
页 |
| · 结果与讨论 | 第100-108
页 |
| 1 ADCP Primmorph与MCP Primmorph成团过程的比较 | 第100-103
页 |
| 2 ADCP Primmorph与MCP Primmorph细胞团维持培养对比 | 第103-104
页 |
| 3 ADCP Primmorph与MCP Primmorph维持培养细胞增殖规律对比 | 第104-105
页 |
| 4 梯度分离各细胞组分与混合细胞端粒酶活性对比 | 第105-107
页 |
| 5 ADCP Primmorph与MCP Primmorph的结构差异 | 第107-108
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| · ADCP Primmorph培养中的特殊现象 | 第108-113
页 |
| · ADCP Primmorph的细胞贴壁生长 | 第108-109
页 |
| · ADCP Primmorph的成团特征 | 第109-110
页 |
| · ADCP Primmorph分泌胶原与骨针的生长 | 第110-112
页 |
| · ADCP Primmorph的光敏感特性 | 第112-113
页 |
| · 小结 | 第113-114
页 |
| 第六章 ADCP Primmorph传代初步探索 | 第114-123
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| · 引言 | 第114
页 |
| · 实验材料与方法 | 第114-115
页 |
| · 材料 | 第114
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| · 方法 | 第114-115
页 |
| · 离散传代培养 | 第114-115
页 |
| · 切块传代培养 | 第115
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| · 结果与讨论 | 第115-122
页 |
| · 离散传代培养的细胞生长观察 | 第115-119
页 |
| · 离散传代培养的细胞活性变化 | 第119
页 |
| · 离散传代培养中的细胞增殖规律 | 第119-120
页 |
| · 切块传代方式中的细胞团生长规律 | 第120-122
页 |
| · 小结 | 第122-123
页 |
| 第七章 海绵细胞团培养色素活性物质代谢调控初步考察 | 第123-141
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| · 引言 | 第123
页 |
| · 海绵色素的组成分析和半定性研究 | 第123-131
页 |
| · 实验材料与方法 | 第123-125
页 |
| · 结果与讨论 | 第125-131
页 |
| · Hp-EAP的生物活性 | 第131-134
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| · 实验材料与方法 | 第131-132
页 |
| · 结果与讨论 | 第132-134
页 |
| · 繁茂膜海绵色素在细胞培养中的代谢特征 | 第134-139
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| · 实验材料与方法 | 第134-135
页 |
| · 结果与讨论 | 第135-139
页 |
| · 结论 | 第139-141
页 |
| 第八章 结论 | 第141-147
页 |
| · 结论 | 第141-142
页 |
| · 本论文的几点重要发现 | 第142-143
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| · 后续工作建议 | 第143-147
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| 附录1. 细胞团形成流程 | 第147-148
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| 附录2. 实验所用仪器一览 | 第148-149
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| 附录3. 实验所用药品一览 | 第149-150
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| 附录4. 常用培养基与试剂配方 | 第150-152
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| 参考文献 | 第152-164
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| 符号说明 | 第164-165
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| 作者简历 | 第165-167
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| 致谢 | 第167
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