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钙、磷对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化影响的研究
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钙、磷对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化影响的研究
论文目录
 
中文摘要第1-6 页
ABSTRACT第6-14 页
符号说明第14-16 页
第一部分 文献综述第16-60 页
　　第一章 钙、磷与骨代谢第16-30 页
　　　　1 骨代谢第16-24 页
　　　　　　· 破骨细胞与骨吸收第16-19 页
　　　　　　· 成骨细胞与骨形成第19-24 页
　　　　2 钙代谢第24-26 页
　　　　3 磷代谢第26-27 页
　　　　4 钙、磷与骨代谢第27-30 页
　　第二章 成骨细胞的体外培养及应用第30-38 页
　　　　1 成骨细胞的生物学特性第30-31 页
　　　　2 成骨细胞的原代培养第31-34 页
　　　　　　· 酶消化法第31-32 页
　　　　　　· 组织块移行生长法第32 页
　　　　　　· 骨内成骨细胞培养法第32-33 页
　　　　　　· 骨膜内成骨细胞培养第33-34 页
　　　　　　· 不同种属成骨细胞的培养第34 页
　　　　3 成骨细胞的鉴定第34-35 页
　　　　　　· 形态观察第34-35 页
　　　　　　· 生物学鉴定第35 页
　　　　4 成骨细胞的应用第35-37 页
　　　　5 成骨细胞的应用前景第37-38 页
　　第三章 体外成骨细胞的表型分化及其蛋白表达第38-60 页
　　　　1 成骨细胞的起源及体内生长发育第38-40 页
　　　　2 体外成骨细胞的分化及蛋白表达第40-60 页
第二部分 实验研究第60-118 页
　　第一章 成骨细胞原代培养方法的建立及鉴定第61-70 页
　　　　1 材料第61-62 页
　　　　　　· 实验动物第61 页
　　　　　　· 主要试剂第61 页
　　　　　　· 主要仪器第61-62 页
　　　　2 方法第62-65 页
　　　　　　· 溶液的配制第62-63 页
　　　　　　· 成骨细胞的分离第63-64 页
　　　　　　　　· 成骨细胞的取材第63 页
　　　　　　　　· 消化传代第63 页
　　　　　　　　· 成骨细胞的纯化第63-64 页
　　　　　　· 活细胞的观察检测第64 页
　　　　　　　　· 台盼蓝染色第64 页
　　　　　　　　· 形态学观察第64 页
　　　　　　· 成骨细胞的鉴定第64-65 页
　　　　　　　　· 碱性磷酸酶（ALP）染色第64 页
　　　　　　　　· 矿化结节染色第64-65 页
　　　　3 结果第65-66 页
　　　　　　· 细胞成活率第65-66 页
　　　　　　· 成骨细胞原代及传代培养的生物学特征第66 页
　　　　　　· 碱性磷酸酶染色光镜观察第66 页
　　　　　　· 矿化结节光镜观察第66 页
　　　　4 讨论第66-70 页
　　第二章 钙、磷对成骨细胞形态及细胞增殖的影响第70-84 页
　　　　1 材料第70-71 页
　　　　　　· 实验动物第70 页
　　　　　　· 主要试剂第70 页
　　　　　　· 主要仪器第70-71 页
　　　　2 方法第71-74 页
　　　　　　· 溶液的配制第71 页
　　　　　　· 成骨细胞的培养第71 页
　　　　　　· 实验设计第71 页
　　　　　　· 成骨细胞表面结构的观察第71-72 页
　　　　　　· 成骨细胞超微结构的观察第72-73 页
　　　　　　· 成骨细胞增殖的检测（MTT 法）第73-74 页
　　　　　　· 成骨细胞细胞周期的检测第74 页
　　　　　　· 数据处理第74 页
　　　　3 结果第74-80 页
　　　　　　· 成骨细胞表面结构变化第74 页
　　　　　　· 成骨细胞超微结构的变化第74-77 页
　　　　　　· 成骨细胞的增殖第77-79 页
　　　　　　· 成骨细胞细胞周期的变化第79-80 页
　　　　4 讨论第80-84 页
　　第三章 钙、磷对成骨细胞体外表型分化功能的影响第84-95 页
　　　　1 材料第84-85 页
　　　　　　· 实验动物第84 页
　　　　　　· 主要试剂第84 页
　　　　　　· 主要仪器第84-85 页
　　　　2 方法第85-86 页
　　　　　　· 成骨细胞的培养第85 页
　　　　　　· 实验设计第85 页
　　　　　　· 细胞内碱性磷酸酶活性的检测（PNPP）第85 页
　　　　　　· 细胞内总蛋白质的检测（BCA 法）第85 页
　　　　　　· Ⅰ型胶原的检测（酶联免疫吸附法）第85 页
　　　　　　· 骨桥蛋白的检测（免疫组化法）第85-86 页
　　　　　　· 数据处理第86 页
　　　　3 结果第86-92 页
　　　　　　· 碱性磷酸酶活性变化第86 页
　　　　　　· 蛋白质含量的变化第86-88 页
　　　　　　· Ⅰ型胶原含量的变化第88-89 页
　　　　　　· 骨桥蛋白含量的变化第89-92 页
　　　　4 讨论第92-95 页
　　第四章 钙、磷对成骨细胞Ca~(2+)、GJIC 和矿化功能的影响第95-103 页
　　　　1 材料第95-96 页
　　　　　　· 试验动物第95 页
　　　　　　· 主要试剂第95-96 页
　　　　　　· 主要仪器第96 页
　　　　2 方法第96-97 页
　　　　　　· 成骨细胞的培养第96 页
　　　　　　· 实验设计第96 页
　　　　　　· 细胞内Ca~(2+)测定第96 页
　　　　　　· 成骨细胞间隙连接通讯（GJIC）测定第96 页
　　　　　　· 钙化功能检测第96-97 页
　　　　　　· 数据处理第97 页
　　　　3 结果第97-98 页
　　　　　　· 细胞内Ca~(2+)沉积的变化第97-98 页
　　　　　　· 细胞间隙连接通讯的变化第98 页
　　　　　　· 体外钙化功能的变化第98 页
　　　　4 讨论第98-103 页
　　第五章 钙、磷对成骨细胞标志性蛋白mRNA 表达的影响第103-118 页
　　　　1 材料第103-104 页
　　　　　　· 试验动物第103 页
　　　　　　· 主要试剂第103 页
　　　　　　· 主要仪器第103-104 页
　　　　2 方法第104-109 页
　　　　　　· 成骨细胞的培养第104 页
　　　　　　· 实验设计第104 页
　　　　　　· 采样前准备第104 页
　　　　　　· RNA 的提取第104-105 页
　　　　　　· 引物设计第105-106 页
　　　　　　· cDNA 的制备第106-107 页
　　　　　　· 荧光定量PCR 反应第107 页
　　　　　　· Ct 值与△△ct 计算方法及结果分析第107-109 页
　　　　　　· 数据处理第109 页
　　　　3 结果第109-114 页
　　　　　　· 总RNA 的检测第109-110 页
　　　　　　· 钙、磷对ALP、Col-Ⅰ、OPN 和BGP mRNA 的表达的影响第110-114 页
　　　　　　　　· 熔解曲线分析第110-112 页
　　　　　　　　· ALP、Col-Ⅰ、OPN 和BGP mRNA 表达实时荧光定量结果第112-114 页
　　　　4 讨论第114-118 页
结论第118-119 页
参考文献第119-128 页
致谢第128-129 页
攻读博士学位期间发表的文章第129 页

本篇论文共129页，点击这进入下载页面。
 
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